Ответы на коллоквиум по микре и иммунологии.

Ответы на коллоквиум по микре и иммунологии.

I. Иммунология. Определение, задачи, методы. История развитии иммунологии.

Иммунология — междисциплинарная медицинская наука, изучающая строение, эволюцию и функционирование иммунной системы различных организмов (человека, животных, растений), механизмы и способы защитных реакций, направленных на сохранение их структурной и фунциональной целостности и биологической индивидуальности.

Иммунология выделилась в самостоятельную науку более 100 лет тому назад. Не основоположниками являются французский химик Луи Пастср, положивший начало вакцинопрофилактике инфекционных заболеваний с помощью живых вакцин; русский биолог Илья Мечников -сформулировавший основы фагоцитарной теории (клеточного иммунитета);немецкий химик Пауль Эрлих и немецкий врач Робет Кох. За короткую историю иммунология выросла в самостоятельную отрасль с самостоятельными институтами, журналами, национальными и международными обществами.

В настоящее время выделяют общую и частную (прикладную) иммунологию. Общая, или фундаментальная, иммунология подразделяется на молекулярную иммунологию, клеточную имму­нологию, иммуногенетику, иммунотолерантность, иммунохимию, иммунокиберпетнку, эволюционную иммунологию, физикохимическую иммунологию. Она изучает структуру и функцию молекул, клеток и органов иммунной системы. функционирование последней как единой гомеостатической. самоуправляемой системы, а также ее связи с другими системами — нервной, эндокринной и тд. Важными направлениями частной иммунологии являются иммунопрофилактика, инфекционная иммунология, иммунопатология, иммунобиотехнология. трансплантационная иммунология, иммунология репродукции, клиническая, ветеринарная, экологическая и трансгенная иммунология, иммуногенотерапия.

Ее основная цель— изучение патогенеза иммунозависимых заболеваний, разработка на основе теоретических подходов иммунобиологических профилактических и терапевтических препаратов (вакцин, иммуноглобулинов, цитокинов и их смесей — коктейлей, рецепторов и др.).

Основные задачами:

изучение строения, функции и развития иммунной системы при патологии и в норме: изучение роли иммунной системы в возникновении и развитии инфекционных и неинфекционных болезней;разработка и использование методов иммунодиагностики, иммунопрофилактики и иммунотерапии инфекционных и неинфекцнонных заболеваний человека.

Meтоды иммунологии:

иммуноморфологический;

иммунохимический:

иммуиобиологический,

экспериментальный.

 

  1. Иммунная система организма. Характеристика. Органы, иммунокомпетентные клетки.

Иммунная система людей и животных обеспечивает специ­фическую защиту организма от генетически чужеродных молекул и клеток, в том числе от всевозможных инфекционных агентов — бактерий, вирусов, грибов и простейших. Клетки и молекулы иммунной системы обладают способностью распознавать чуже­родные антигены инфекционных агентов, отличать их от анти­генов собственных клеток и биополимеров, что в конечном итоге приводит к их уничтожению или удалению, т. е. к сохранению постоянства внутренней среды организма. Иммунная система обладает «памятью», которая позволяет быстро и эффектив­но удалять повреждающий чужеродный агент при повторном его распознавании. В то же время наличие естественной им­мунологической толерантности к собственным ан­тигенам предотвращает развитие самоповреждающих иммуноло­гических реакций.

Понятием «иммунная система» подчеркивается единство раз­ных органов и клеток, связанных общностью происхождения, функциональным взаимодействием и общими механизмами регу­ляции.

 

К центральным органам иммунной системы человека отно­сятся костный мозг и тимус (вилочковая железа), в которых происходят пролиферация и дифференцировка иммунокомпетентных клеток: Т- и В-лимфоцитов

Вилочковая железа (тимус). Предшественники Т-лимфоцитов образуются из стволовых клеток костного мозга, которые посту­пают в тимус. В корковом слое тимуса происходит образование малых лимфоцитов (тимоцитов), которые активно размножа­ются. Кортикальные лимфоциты являются незрелыми клетками. Под влиянием гормонов тимуса и факторов микроокружения

они дифференцируются в зрелые Т-лимфоциты, мигрируя в моз­говой слой тимуса, а затем в кровь.

Лимфоидная паренхима тимуса достигает максимального развития к 17 годам, а затем уменьшается, но полностью не исчезает.

Костный мозг. В костном мозге содержатся стволовые крове­творные клетки, являющиеся родоначальниками всех форменных элементов крови, в том числе лимфоцитов. В ретикулярной строме костного мозга происходит дифференцировка В-лимфоцитов, которые созревают до малых лимфоцитов из клеток-предшест­венников.

Периферические лимфоидные органы. К ним относятся много­численные скопления лимфоидной ткани, располагающиеся под слизистыми оболочками желудочно-кишечного, дыхательного и мочеполового трактов (групповые лимфатические фолликулы, миндалины и др.), лимфатические узлы и селезенка. В перифе­рических лимфоидных органах происходят пролиферация и диф­ференцировка лимфоцитов под влиянием антигена, поступившего в организм.

В лимфатических узлах, селезенке, миндалинах, групповых лимфатических фолликулах имеются две зоны. Одна из них назы­вается тимусзависимой, поскольку там расселяются Т-лимфо­циты, другая В-зависимой, в которой располагаются В-лимфо-циты. В этих зонах происходят антигензависимая пролиферация и дифференцировка данных клеток и их кооперация.

  1. Молекулы иммунной системы — CD-антигены, рецепторы, молекулы I, II, III классов ГКГС, адгезины, суперсемейство иммуноглобулинов.

Установлено, что на поверхности клеток имеются дифференцировочные антигены, разные не только у разных типов клеток, но и у одного типа клеток на разных стадиях дифференцировки. Клеточные поверхностные молекулы, идентифицированные с помощью моноклональных антител, известны как «Claster of differentiation» — кластер дифференцировки, и эти антигены имеют числовую нумерацию: CD3, CD4, CD8, CD20, CD56 и т.д.

Антигены главного комплекса гистосовместимости (МНС). МНС у человека называются HLA. Антигены МНС I класса имеют все ядросодержащие клетки, а МНС II класса — только антигенпрезентирующие клетки. Антигены МНС I и II классов участвуют в презентации (представлении) клетками антигенного пептида Т-лимфоцитам: продукты МНС I класса презентируют (представляют) антигенный пептид CD8+ Т-лимфоцитам, а МНС II класса CD4+ Т-лимфоцитам. Имеются неклассические молекулы МНС, или МНС-подобные (например, CD1).

Выявлено участие растворимых молекул I класса в различных этапах иммунного ответа: а) связывании антиНLАантител; б) ингибиции цитотоксичности аутореактивных Т-лимфоцитов; с) формировании иммунологической толерантности.

Молекулы II класса распознавания являются продуктами DR, DQ и DP генов, гетеродимеры тяжелой (а) и легкой (в) гликопротеидных цепей. Молекулярная масса альфа цепи 30-34 кДа, а бeта — 26-29 кДа. Внеклеточная часть молекулы представлена al и а2, или в1 и в2 и соединена небольшой трансиенбранной областью (30 аминокислот) и коротким цитоплазматическин доменом (15 аминокислот). Они экспрессированы преимущественно на мембране иммунокомпетентных клеток. Антигены МНС I класса имеют все ядросодержащие клетки, а МНС II класса — только антигенпрезентирующие клетки. Антигены МНС I и II классов участвуют в презентации (представлении) клетками антигенного пептида Т-лимфоцитам: продукты МНС I класса презентируют (представляют) антигенный пептид CD8+ Т-лимфоцитам, а МНС II класса CD4+ Т-лимфоцитам.

  1. Цитокины. Определение Классификация. Клетки-продуценты. Биологическая роль Клиническое использование. Хемокины.

Цитокины — разнообразная, группа растворимых межклеточных коммуникационных молекул пептид­ной природы, обладающих регуляторными и эффекторными свойствами, которые продуцируются стимулированными клетками. Они регулируют рост, дифференциацию и функцию многих типов клеток, улучшают кооперацию между ними и определяют спектр их биологической активности. Активность цитокинов проявляется локально в очень низких концентрациях (пико- и наномолярных) и важна в механизмах воспаления, естественного и приобретенного иммунитета.

Классификация цитокинов. Основные группы цитокинов: Интерфероны, Интерлейкины, Фактор некроза опухолей, Колониестимулирующиефакторы, Ростовые факторы. В зависимости от типа клеток, продуцирующих цитокины, их делят на монокины (ИЛ-1, ФНО), синтезируемые моницитами, макрофагами, и лимфокины (ИЛ-2, ИЛ-4, ИЛ-5, ИЛ-10 и др.), синтезируемые лимфоцитами.

Биосинтез и механизм действия питокинов.

Цитокины синтезируются клетками-продуцентами после их взаимодействия со стимуляторами. Молекулы стимуляторов связываются с мембранными рецепторами клетки, вызывая тем самым ее активацию (изменение биохимических процессов, экспрессию определенных генов, в том числе и кодирующих цитокины), биосинтез и секрецию определенного спектра цитокинов. Биологические эффекты цитокинов весьма разнообразны. Интерфероны^

В ответ на адсорбцию на мембране клеток-мишеней-вирусных частиц или их стимуляцию вирусной нуклеиновой кислотой, а также другими стимуляторами интерферон-а секретируется мононуклеарными клетками (моноцитами и лимфоцитами). ИНФ- р* продуцируется фибробластами и

некоторыми эпителиальными клетками после их стимуляции эндотоксинами бактерий, ФНО и ИЛ-1. у-интерферон продуцируется Т-лимфоцитами. Особую роль в этом играют Т-хелперы первого типа (Тп1). Поскольку интерфероны проявляют неспецифическую противовирусную активность, то они являются наиболее важным элементом естественного иммунитета организма. Интерфероны, продуцируемые инфицированными клетками (обычно ИНФ- Р), индуцируют состояние проти­вовирусной резистентности окружающих клеток и организма в целом. Основное противовирусное дей­ствие интерферонов заключается ингибиции трансляции вирусной мРНК. Интерферон связывается с соответствующим рецептором на мембране клеток мишеней. Это связывание вызывает дерепрессию нескольких генов, которые детерминируют вирусные ингибиторные белки, которые блокируют трансляцию вирусной мРНК, но не мРНК клетки хозяина. Противовирусные эффекты интерферонов а и Рг очень близки. Оба типа интерферонов нашли клиническое применение для лечения вирусных инфекций.Биологические эффекты у-интерферона отличаются принципиально. Он синтезируется в процессе иммунного ответа в результате антигенспецифического распознавания и активации соответствующих клонов Т-лимфоцитов хелперов первого типа. Данная субпопуляция Т-хелперов является наиболее важным элементом клеточного иммунного ответа и отвечает за реализацию реакций гиперчувствительности замедленного типа (ГЗТ). Этот механизм формирования специфической резистентности особенно важен для защиты организма от внутриклеточных патогенов, таких как микобактерии, листерии и, безусловно, вирусы, у — интерферон способен стимулировать противомикробную активность макрофагов и естественных киллеров.

Интерлейкины — низкомолекулярные пептиды, выполняющие функцию коммуникационных сигнальных биомолекул между различными популяциями лейкоцитов.

Факторы некроза опухолей (ФНО)

Колониестимулирующие факторы (КСФ) — группа цитокинов, которые образуются многими типами клеток в тканях или крови, а свою специфическую биологическую активность проявляют в костном.мозге, где стимулируют кроветворение..

Все это обусловило успех клиническому внедрению препаратов КСФ-1 для быстрого восстановления лейкопоэза после высокодозовой химиотерапии, после трансплантации костного мозга и лечения солидных опухолей. Колониестимулирующий фактор гранулоцитов (КСФ-Г).

Ростовые факторы. Большая и разнородная группа факторов, объединенных способностью определять способности эмбриогенеза, заживления ран и репарации тканей. К ним относятся: трансформирующий ростовой фактор, фактор роста фибробластов, фактор роста нервов, и др.

Хемокины — низкомолекулярные цитокины, ответственные за хемотаксис клеток (привлекают в очаг воспаления лимфоциты и лейкоциты).

  1. Иммунитет, виды иммунитета. Отличительные черты естественного (врожденного) и приобретенного иммунитета. Характеристика противоинфекционного иммунитета.

Под иммунитетом понимают совокупность биологических явлений (процессов и механизмов), направленных на сохранение постоянства внутренней среды организма (гомеостаза) и защиту организма от инфекционных и других генетически чужеродных для него агентов.

Виды иммунитета:

Иммунитет:

  • Естественный
  • Приобретенный
    • Антимикробный
    • Антитоксический
    • Активный
      • Постинфекционный
      • Поствакцинальный
    • Пассивный
      • Постсывороточный
      • Плацентарный

Естественный, или видовой, иммунитет пред­ставляет собой невосприимчивость одного вида животных или человека к микроорганизмам, вызывающим заболевания у дру­гих видов. Примером естественного (видового) иммунитета яв­ляется невосприимчивость человека к чуме собак, рогатого скота и другим заболеваниям животных, которые в свою очередь не чувствительны к возбудителям гонореи, менингита, корн и др. Естественный иммунитет является наиболее совершенной и проч­ной формой невосприимчивости.

Приобретенным иммунитетом называют такую не­восприимчивость организма человека или животных к инфекци­онным агентам, которая формируется в процессе его индивидуального развития и характеризуется строгой специфичностью. Так, человек, в детстве переболевший корью или ветряной ос­пой или другим инфекционным заболеванием, как правило, при­обретает к нему невосприимчивость. При этом он сохраняет чувствительность к другим возбудителям инфекционных бо­лезней. Может быть активным и пассивным.

Инфекционный иммунитет сохраняется в организме в течение того времени, пока в нем находится возбудитель соответствующего заболевания.

 

  1. Естественный иммунитет. Определение. Факторы неиммунной и иммунной природы и их характеристика.

Иммунитет естественный — невосприимчивость организма к возбудителям инфекционных заболеваний видовая. В основе лежат естественные неспецифи­ческие механизмы, обеспечивающие резистентность к широкому кругу патогенов

[таблица]

Вещество

 

Механизм действия

 

Органические кислоты Поддерживают низкую рН кожи; многие микробы чувстви­тельны к ним в низких концентрациях
Жирные кислоты Нарушают функцию мембран
Слюна Содержит ферменты, разрушающие клеточную стенку бак­терий; антитела, выполняющие функцию опсонинов
Слеза Содержит лизоцим, лизирующий бактерии (пре­имущественно грам+) путем разрушения клеточной стенки
Лактоферрин и трансферрин Связывают железо, необходимое для роста микробов
Лактопероксидаза Окисляет ферменты и белки клеточной стенки
HCI Денатурация белков
Желчные кислоты Разрушение мембран
Трипсин Гидролиз белков клеточной стенки и мембраны
Слизь Задерживает посторонние частицы; конкурирует за рецеп­торы и блокирует адгезию микробов
Спермин Полиамин, выделенный из спермы и мочи — угнетает рост грамположительных бактерий

Важные для защиты физиологические факторы: Температура тела — многие микробы плохо растут при 37°С

Кислород — высокое парциальное содержание кислорода угнетает рост микробов (анаэробов) в тканях легких

Гормональный баланс (избыточное выделение гормонов — стероидов — резко снижает защитные функции организма)

Возраст: дети до трех лет и пожилые люди — старше 75 лет — более подвержены инфекциям из-за ослабления иммунитета.

Преодолев защитные механизмы барьерных органов, микроорганизмы сталкиваются со спе­циализированными факторами второго эшелона обороны — гуморальными и клеточными механизмами неспецифического (врожденного) иммунитета.

7.Комплемент, путн активации, функции. Значение в противоинфекционной защите. Методы определений активности и показатели.

Система комплемента — совокупность белков сыворотки крови, связанных каскадом последовательной активности при их взаимодействии с комплексом антиген-антитело — (классический путь), либо со структурами полисахаридной природы (альтернативный путь).

Классическая система комплемента состоит из 9 компонентов (от CI до С9) и трех регулирующих гомеостаз системы белков (ингибитора CI эстеразы, инактиватора СЗб и инактиватора С6). Третий компонент (СЗ) является центральным белком всей системы и его количество в сыворотке составляет примерно 75%всей массы белков комлемента.

Альтернативный путь активации включает белки (факторы) В и Д, а также пропердии. Для функционирования классического пути активации комплемента необходимы ионы Ca2+, a альтернативного Mg2+.

Процесс активациитомплемента протекает стадийно с образованием ферментных комплексов, которые действуют на последующий компонент. При этом из нативных молекул отдельных компонентов образуются многие биологически активные соединения, играющие важную роль в развитии воспаления, иммунного ответа, аллергии, а также в резистентности к инфекции. Для осуществления бактериолиза или цитолиза требуется активация компонентов комплемента от СЗ до С9 по классическому или альтернативному пути. В роли опсонинов выступают большие фрагменты СЗб, С4б — адсорбируясь на поверхности клеток, они усиливают фагоцитарную реакцию, способствуют иммунному прилипанию комплекса АГ-АТ-комплемент к поверсности иммунокомпетентных клеток (В-лимфоциты). Низкомолекулярныё фрагмента -полипептиды — СЗа, С5а способствуют высвобождению биогенных аминов (гистамина, серотонина) из тучных клеток, вызывают сокращение гладкой мускулатуры, повышают сосудистую проницаемость, вызывают хемотаксис нейтрофилов и моноцитов в очаг воспаления. Компоненты CI-C4 нейтрализуют некоторые вирусы. Синтез белков комплемента осуществляется клетками системы мононуклеарных фагоцитов, фибластов, печенью. У человека встречаются генетические дефекты по большинству компонентов комплемента. Клинически они проявляются в форме синдрома системной красной волчанки, рецидивирующих пиогенных инфекций, ангионевротическим отеком.

Данные о функциональной активности белков комплемента и их концентрации дают очень важную информацию о протекании заболевания, могут быть использованы для оценки тяжести течения, эффективности терапевтических мероприятий, прогноза заболевания.

МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ СИСТЕМЫ КООМПЛИМЕНТА

  1. I. Определение общей гемолитической активности классического пути. Сыворотку крови разводят физиологическим раствором 1:10 и вносят в пробирки в объеме от 0,05 до. 0,5 мл. Объем проб доводят до 1,5 мл физиологическим раствором и вносят по 1,5 мл гемолитической системы (смесь равных объемов 3% взвесей бараньих эритроцитов и гемолитической сыворотки). Пробирки инкубируют при 37°С 45 минут,- охлаждают при 4°С для остановки реакции и центрифугируют при 1500 оборотов 4-5 минут. После центрифугирования определяют объем сыворотки, вызывающий лизис 50% сенсибилизированных эритроцитов (условную гемолитическую единицу активности комлемента — СН 50), затем рассчитывают количество СН 50 на мл цельной сыворотки. У здоровых людей титр комлемента (СН 50 на мл) составляет примерно 40-60 СН 50.

Гемолитическую активность альтернативного пути комлемента определятт также, но вместо сенсибилизированных бараньих эритроцитов используют несенсибилизированные кроличьи эритроциты и физиологический раствор, содержащий ионы Mg, но без Са для блокирования классического пути активации.

2.0пределение функциональной активности отдельных компонентов. Этот метод позволяет определить численность функционально активных молекул в I мл сыворотки крови. Для этого к сенсибилизированным эритроцитам добавляют реагент на определенный компонент комплемента ( в качестве реагента используют либо смесь компонентов комлемента, исключая искомый, либо сывоттку крови, лишенную активности этого компонента. Сыворотку для титрования компонентов классического пути разводят в 40-50 -раз, а альтернативного — в 5-7 раз. Таким образом можно уста­новить дефект определенных компонентов и определить профиль комплемента при различных заболеваниях.

  1. Иммунохимическое определение концентрации компонентов комплемента. Данный метод исследования позволяет определить концентрацию каждого из белков комплемента, используя антисыворотки (антитела) к ним. Концентрация белков выражается в г\л. Для определения используют .метод радиальной иммунрдиФФузии в arap^B^Mjgjie^

4 Определение активности комплемента и его компонентов методом радиального гемолиза в агаровом геле. Гемолитическую систему смешивают с расплавленным агаром в соотношении 1:7 и быстро выли­вают в стерильные чашки Петри. После застывания в агаре проделывают лунки диаметром 4.мм- (до 15 лунок на 1-ой чашке). Лунки заполняются испытуемыми сыворотками и помещают чашки в холодильник при 4°С на 21 час для диффузии белков комплемента в агар. Затем чашки помещают в термостат на 60 минут для проявления зон гемолиза. Критерием активности комплемента служит

квадрат диаметра зон гемолиза.

 

  1. Фагоцитоз. Фагоциты. Стадии фагоцитоза. Механизмы внутриклеточной бактерицидное действие. Исходы (завершённый, незавершенный фагоцитоз). Хемотаксины, опсонины, происхождение и роль в противоинфекционном иммунитете.

Фагоцитоз — поглощение фагоцитом крупных макромолекулярных комплексов, бактерий. Клетки-фагоциты нейтрофилы и моноциты/макрофаги. Фагоцитировать могут также эозинофилы (наиболее эффективны при антительминтном иммунитете). Процесс фагоцитоза усиливают, обволакивающие объект фагоцитоза.

Опсонины — белки, усиливающие фагоцитоз: IgG, белки острой фазы (С-реакгивный протеин, маннансвязывающий лектин); липополисахаридсвязывающий протеин, компоненты комплемента -СЗЬ, С4Ь; сурфактантные протеины легких SP-A, SP-D.

Моноциты составляют 5-10 %, а нейтрофилы 60-70 % лейкоцитов крови. Поступая в ткань моноциты формируют популяцию тканевых макрофагов: купферовские клетки (или звездчатые ретикулоэндотелиоциты печени), микроглия ЦНС, остеокласты костной ткани, альвеолярные и интерстициальные макрофаги. Фагоциты направленно перемещаются к объекту фагоцитоза, реагируя на хемоатграктанты: вещества микробов, активированные компоненты комплемемента (С5а, СЗа) и цитокины. Плазмалемма фагоцита обхватывает бактерии или другие корпускулы и собственные поврежденные клетки. Затем объект фагоцитоза окружается плазмалеммой и мембранная везикула (фагосома), погружается в цитоплазму фагоцита. Мембрана фагосомы сливается с лизосомой, рН закисляется до 4,5; активируются ферменты лизосомы. Фагоцитированный микроб разрушается под действием ферментов лизосом, катионных белков дефензинов, катепсина G, лизоцима и др. факторов. При окислительном (дыхательном) взрыве в фагоците образуются токсичные антимикробные формы кислорода — перекись водорода Н202, супероксиданион 02-, гидроксильный радикал ОН-, синглетный кислород. Кроме этого антимикробным действием обладают окись азота и радикал NO-. Макрофаги выполняют защитную функцию еще до взаимодействия с другими иммунокомпетентными клетками (неспецифическая резистентность). Активация макрофага происходит после разрушения фагоцитируемого микроба, его процессинга (переработки) и презентации (представлении) антигена Т-лимфоцитам. Фагоцитоз может быть завершенным, завершающимся гибелью захваченного микроба, и незавершенным, при котором микробы не погибают. Примером незавершенного фагоцитоза является фагоцитоз гонококков, туберкулезных палочек и лейшманий.

  1. Методы определения показателей фагоцитоза.

ИССЛЕДОВАНИЕ ФАГОЦИТАРНЫХ КЛЕТОК

Изучение фагоцитарных клеток осуществляется несколькими методами:

А. Прямым морфологическим методом. Микробы смешиваются с фагоцитами в пробирке или в организме лабораторных животных, через 15—120 минут из смеси приготавливаются микропрепараты на предметных стеклах, окрашиваются по Романовскому-Гимзе и подсчитываются число фагоцити­рующих фагоцитов и число фагоцитированных микробов. По ним производят расчет следующих показателей:

ФАГОЦИТАРНЫЙ ПОКАЗАТЕЛЕЛЬ = 100%*(число фагоцитирующих фагоцитов/общее число фагоцитов)

ФАГОЦИТАРНОЕ ЧИСЛО= (число фагоцитированных микробов/число активных фагоцитов)

ПОКАЗАТЕЛЬ ЗАВЕРШЕННОСТИ ФАГОЦИТОЗА=

(ФЧ(через 15мин)-ФЧ(через 120мин))/ФЧ(через15мин)*100%

Б. Непрямыми методами

Они основаны на определении функциональной активности различных стадий фагоцитарного процесса:

определение хемотаксического индекса позволяет установить способность фагоцитов к направленному передвижению в сторону хемоаттрактанта -активированного комплемента, экстракта микробов, казеината натрия и др. Подсчитывается отношение количества фагоцитов, проникающих через микропористые фильтры в опыте и в контроле;

аттракция фагоцитирующегося объекта к поверхности фагоцита определяется по изменению степени метаболизма фагоцита, которая суммарно определяется в тесте хемилюминесценцищбактерицидность, фагоцитов определяется по активности бактерицидных систем, заключенных в гранулах клеток:

перекиси водорода — пероксидазы, супероксидных ионов -супероксиддесмутазы, лизоцима и др. Переваривающая способность фагоцитов оценивается по активности

лизосомальных ферментов, кислой и щелочной фосфатаз, катепсина и др.

 

  1. Иммунный ответ и факторы, определяющие его выраженность. Генетический контроль гуморального и клеточного иммунного ответа.

Иммунный ответ — это сложная многокомпонентная кооперативная реакция ИС организма, индуцированная антигеном и направленная на его элиминацию. Явление иммунного ответа лежит в основе иммунитета. \

Иммунный ответ зависит от:

1 Антигена — свойства, состав, молекулярная масса, доза, кратность попадания, длкгеганость контакта;

2 Состояния организма — иммунологическая реактивность;

3 Условий внешней среды.

Для иммунного ответа характерно:

1 Клональность — есть клоны Т- и В-лимфоцитов, которые специфичны по отношению к определенным эпитопам (их совокупность называется детерминантной группой);

2 Специфичность;

3 Разнообразие AT и TCR;

4 Формирование в клетках и молекулах эффекторов и клеток памяти;

5 Специфические механизмы действия совместимы с неспецифичными;

6 Контролирование геномом,

7 Деление на естественный и искусственный;

Компоненты иммунного ответа:

1 Антигены;

2 Антигенперерабатывающие и антигенпрезентирующие клетки (имакрофаги);

3 Антигенраспознающие клетки (В- и Т-лимфоциты и их субпопуляции),

4 Антигенраспознающие молекулы (ВЦР, молекулы главного комплекса гистосовместимости);

5 Цитокины — гемопоэтические, ростовые, регуляторные, рецепторные.

Иммунный ответ развивается в периферических лимфоидных органах. ВИО участвуют макрофаги, Т- и В-лимфоциты, фибробласты, ретикулярные клетки.

Макрофаги. Зрелые макрофаги имеют рецепторы к антигенам (Fc), СЗЬ-рецепторы, антигены гистосовместимости. Макрофаги участвуют как в естественном, так и в специфическом ИО. На ранней стадии ИО макрофаги выполняют функцию презентации антигена — в результате фагоцитоза антиген расщепляется, а его эпитоп выносится на мембрану в комплексе с белком МНСП. На конечной стадии ИО макрофаг активируется лимфокинами. В-лимфоциты — распознают антигены, участвуют в гуморальном ИО, имеют рецепторы к эритроцитам мышей, Fc, СЗЬ, к антигенам гистосовместимости.

Они не имеют специфичных антигенраспознающих рецепторов, разделяются на огромное количество клонов. Антиген-распознающим рецептором является молекула иммуноглобулина.

Т- лимфоциты — разделяются на четыре основные субпопуляции — Т-хелперы,

Т-супрессоры, Т-киллеры, и Т -эффекторы. Все они имеют рецепторы к эритроцитам барана, к иммуноглобулинам, белкам системы комплемента (но не имеют рецепторов к СЗЬ), к интерферонам, к антигенам, имеют антигены MHCI и МНСП. Субпопуляции Т-лимфоцитов неоднородны, так, Т-хелперы разделяются на две группы — Т-хелперы 1 и, Т-хелперы 2 . Первые являются активаторами КИО, а вторые — ГИО. Т-лимфоциты

обеспечивают клеточный, антивирусный, антибактериальный иммунитет, ГЗТ.

В зависимости от путей реализации иммунный ответ разделяется на гуморальный (ГИО) и клеточный (КИО), однако в чистом виде ни один из них не проявляется

ГИО контролируется красным костным мозгом, а КИО — тимусом.

  1. Гуморальный иммунный ответ, этапы. Отличительные черты первичного и вторичного иммунного ответа.

Гуморальный иммунный ответ контролируется красным костным мозгом, развивается на растворимые агенты — белки, ЛПС, экзотоксины, на внеклеточных паразитов.

Ответ иммунный первичный (ПИО) — реакция иммунной системы организма на первое поступление (введение) антигена, вакцины. Отличается непродолжительностью и низкой специфичностью. Сопровождается биосинтезом преимущественно специфических антител IgM класса. При этом антитела IgM и IgA классов продуцируются значительно быстрее, нежели антитела IgG изотипа. Этот тип иммунитета можно рассматривать как экстренное реагирование иммунной системы на воздействие инфекции. В динамике его развития различают три фазы — индуктивную (латентную), продуктивную и затухания. Первая длится 6-7 дней. В этот период антиген подвергается переработке в фагоцитарных и других АПК и презентируется клонам Т- и В- лимфоцитов. Последние затем трансформируются в лимфобласты, пролиферируют, дифференцируются и превращаются в плазматические клетки, эффекторные и регуляторные Т-клетки, синтезирующие антитела и клетки памяти, специфичные к данному антигену. Во время продуктивной фазы осуществляются биосинтез антигенспецифических ан­тител, цитокинов и накопление их в биологических жидкостях (в сыворотке крови, слюне, секретах, цереброспинальной жидкости). При этом уровень специфических антител возрастает экспоненциально и после того как он достигнет максимума, формируется плато. Данный процесс длится от 4 дней до 4 недель. Обычно его пик приходится на 14—21-й день. Максимальное продуцирование антител к белковым антигенам (анатоксинам) длится 3 недели. После этого наступает фаза затухания, а про­дуктивный период постепенно завершается. Причем процесс снижения уровеня антител вначале идет быстро, затем замедляется.

Ответ иммунный вторичный (ВИО) — иммунный ответ на повторное введение антигена в организм. В его основе лежат механизмы иммунологической памяти и прогрессивная клональная селекция антигенспецифических клонов В- и Г- лимфоцитов. В отличие от первичного, возникает на действие антигена в меньшей дозе, развивается быстрее (короче индуктивная фаза) и, как правило, интенсивнее. Кроме того, он более специфичный (синтезируются преимущественно антитела IgG), более напряженный и более зрелый (выше аффинность антител); а вызываемый им протективный эффект сохраняется дольше. Причем динамика процесса антителообразования также носит экспоненциальный характер, но развивается он быстрее, а затухает значительно медленнее. Повторное введение антигена в, организм с высоким уровнем антител к нему может не дать эффекта усиления иммунного ответа. Существует два варианта ГИО. Если ответ происходит на Т — независимые антигены, то это т. н. простой ответ, он возможен потому, что некоторые антигены способны сами активировать Т-лимфоциты. В этом случае синтез IgM не сопровождается образованием клеток памяти. В случае, если ответ формируется в ответ на Т- зависимые антигены, происходит кооперация Т- и В-лимфоцитов. Выделяют следующие стадии: распознавание антигена; презентация антигена — макрофаг поглощает антиген, расщепляет, соединяет с белками МНС I и МКС II и переносит на мембрану; передача информации на Т- хелпер; бласттрансформация В- лимфоцитов, дифференцировка бластов в плазмациты и В- клетки памати; синтез антител и элиминация антигена.

Функция антител: активация системы комплемента, нейтрализация токсинов, опсонизация антигенов, преципитация мелких антигенов.

  1. В-лимфоциты. Характеристика. Основные маркёры. В-клеточный-рецептор. Методы определения содержании м функциональной активности В-лммфоцмт©в.

В-лимфоциты называются так потому, что они впервые выявлены у птиц в специальном центральном органе иммунитета, который называется «сумка Фабрициуса» (bursa of Fabricius) и в котором они проходят стадию созревания. У животных данный орган отсутствует, и ранние стадии созревания В-лимфоциты проходят в костном мозге (bone marrow). Таким образом, термин «В- лимфоцит» обусловлен названием сумки Фабрициуса или костного мозга.

В- лимфоцитами являются лимфоциты, способные синтезировать антитела. Большинство образо­ванных в костном мозге пре-В- лимфоцитов (> 95%) погибают там же в результате процесса селекции клеток. Зрелые В-лимфоциты из костного мозга мигрируют в кровь, а затем во вторичные лимфоидные органы (селезенку, лимфатические узлы, лимфоидные ткани желудочно-кишечного тракта и слизис­тых). Они имеют антигенспецифический В-клеточкый рецептор (ВКР) в виде мембраносвязанных мо­лекул антител, а также ряд поверхностных CD антигенов и рецепторов.

В-лимфоциты могут узнавать нативный антиген в свободном состоянии. Взаимодействие антигена с В-клеточным антигенспецифическим рецептором приводит к активации В-лимфоцитов и их развитию(дифференцировке) в эффекторные клетки, специализирующиеся в биосинтезе антител. Большинство В-лимфоцитов периферической крови экспрессирует на поверхности клетки два изотипа им­муноглобулинов- IgM и IgD. Очень небольшое количество циркулирующих клеток экспрессирует им­муноглобулины G, А или Е изотопов.

Характеристика CD антигенов В- лимфоцитов

CD 19]

CD20 | основные дифференцировочные и идентификационные маркеры

CD22J

CD21 рецептор для СЗд фрагмента системы комплемента

CD 23 рецептор для Fc фрагмента lgE

CD25 рецептор для ИЛ 2

CD32 рецептор для Fc фрагмента IgG

CD35 рецептор для СЗб и С4б белков комплемента

CD 45RB + участие в трансдукции сигнала

CD 49d + рецептор для связывания молекул адгезии -VCAM-1

CD 71 + рецептор для трансферрина

CD 74 + антиген II класса гистосовместимости

CD антигены выполняют три основные функции: а) рецепция молекул цитокинов и адгезинов; б) передача внутриклеточного сигнала; в) осуществление клеточно-клеточных взаимодействий. В-лим­фоциты человека способны связывать эритроциты мыши и образовывать с ними розетки (Вм-розетки), а также формировать розетки с эритроцитами, сенсибилизированными молекулами антител (IgG) и молекулами СЗб фрагмента системы комплемента, что используется в лабораторной практике. Эти свойства совместно с экспрессией CD 5 молекул позволяют выявить субпопуляцию В-лимфоцитов, иммуноглобулиновый репертуар которых комплементарен аутоантигенам, включая ДНК, Fc фрагмент IgG, фосфолипиды и компоненты цитоскелета, и они играют существенную роль в развитии аутоиммунных процессов. В периферической крови процент В-лимфоцитов составляет 10 -15, в лимфатических узлах — 20-25 и в селезенке — 40-45.

Антигекраспознающий В-клеточный рецептор В-линфоцитов (BcR — англ. B-cel I Receptor) построен из молекулы мембранного иммуноглобулина (mlg, состоящий из двух одинаковых тяжелых Н- и двух одинаковых легких — L-цепеи) и двух молекул CD79 (Iga, IgP) — BcR имеет трансмембранные и внутрицитоплазматические сегменты, передающие внутриклеточные сигналы. Исследование количества и функционального состояния В-лимфоцитов В-клетки обнаруживаются в периферической крови по их рецепторному аппарату, а именно:

а) по наличию рецепторов к иммуноглобулинам и 3-ей фракции комплемента — реакция ЕАС-розеткообразования;

б) по наличию иммуноглобулиновых рецепторов — реакция иммунофлюоресценцяи ;

в) по наличию рецепторов к эритроцитам мыши — реакция МЕ-розеткообразования. а) Реакция ЕАС-роэеткообразования ставится в 2 этапа: вначале

готовят реагент, состоящий из эритроцитов быка, антител к ним и комплемента, затем этот образовавшийся комплекс добавляют к лимфоцитамкрови человека. Образуется розетка, которая внешне ничем не отличается от Е-розеток, но метод получения указывает на выявление именноВ-лимфоцитов.

б) Реакция иммунофлюоресценции позволяет обнаружить на поверхности В-лимфоцита иммуноглобулиновые рецепторы. Для этого используются антиглобулиновые сыворотки, меченые люминофорами.

в) Реакция роэеткообразования с мышиными эритроцитами появляется в результате смешивания последних с лимфоцитами периферической крови.

Функциональная характеристика В-лимфоцитов и количества иммуноглобулинов различных классов.Чаще других используется метод радиальной иммунодиффузии в агаре: на стеклянную пластину наливают расплавленный агар, содержаций антитела к даннному классу иммуноглобулинов. В агаре выбивают лунки, в которые вносят образцы изучаемых сывороток. В результате иммунонреципитации, образуются радиальные полоски, диаметр которых зависит от концентрации соответствующего иммуноглобулина. -Определение антител к аутоантигенам или к микробам нормальной микрофлоры.

-Определение титра специфических антител, выраоатывающихся в организме человека после

иммунизации его вакцинами (АВДСДС и др.)

  1. Антигены: структура, классификация, характеристика.

Антиген — Генетически чужеродные вещества, которые при внедрении в организм способны стимулировать иммунный ответ (клеточную реакцию, образование антител, аллергию, толерантность) и специфически реагировать с образовавшимися антителами как in vivo, так in vitro, называют антигенами.

Эпитоп (антигенная детерминанта) — отличительная часть молекулы антигена, обусловливающая специфичность антител и эффекторных Т- лимфоцитов при иммунном ответе. Эпитоп комплементарен активному центру антител или Т-клеточному рецептору. Аллергенами называются антигены, вызывающие аллергию,

Толерогенами называются антигены, вызывающие иммунологическую толерантность. Аутоантигены. Иногда белки собственных тканей (сердца, печени, почек и др.) при соединении с бактериальным белком, токсинами и ферментами бактерий, лекарственными веществами, под влиянием физических факторов (облучение, ожог и др.) изменяют свои физико-химические свойства и становятся чужеродными для собственного организма. На эти антигены организм вырабатывает антитела, возникают аутоиммунные болезни.

Антигены бактерий по локализации подразделяют на капсульные (К), соматические (О), жгутиковые (Н) и антигены экзопродуктов. В свою очередь К — антигены разделяют на (L, В) термолабильные и (А, М) термостабильные антигены.

Соматические антигены. Расположены не только в цитоплазме, а в основном на поверхности микробной клетки, имеют разнообразный химический состав, отличаются термостабильностю. В практике для обнаружения О-антигенов микроорганизмы подвергают температурной обработке. Жгутиковые антигены. Представляют собой термолабильные белковые комплексы жгутиков, обладающих у многих энтеробактерий специфической и неспецифической (групповой) фазой. Капсульные антигены представлены белками, полисахаридами

Среди бактериальных антигенов выделяют так называемые протективные или антигены главного действия, защитные антигены. Выработанные ка них антитела защищают организм от данного микроба. Очищенные протективные антигены могут быть «идеальными» вакцинными препаратами. Гаптен — неполноценный антиген в виде небольшой химической группы; обуславливает специфичность антител при иммунизации комплексом белок-таптен. Самостоятельно гаптен не вызывает образования антител, но может взаимодействовать с антителами.

  1. Антигенная структура бактерий. Групповые, ввдовые, типовые антигены. Перекрестнореагируюшие антигены. Антигенная формула.

Бактериальные антигены:

группоспецифические (встречаются у разных видов одного рода или семейства)

видоспецифические (у различных представителей одного вида);

типоспецифические (определяют серологические варианты — серовары, антигеновары внутри одного вида).

В зависимости от локализации в бактериальной клетке различают К-, Н-, О-антигены (обозначают буквами латинского алфавита).

О-АГ — липополисахарид клеточной стенки грамотрицательных бактерий. Состоит из полисахаридной цепочки (собственно О-Аг) и липида А.

Полисахарид термостабилен (выдерживает кипячение в течение 1-2 часов), химически устойчив (выдерживает обработку формалином и этанолом). Чистый О-АГ слабо иммуногенен. Проявляет вариабельность структуры и по нему различают много серовариантов бактерий одного вида. Например, для каждой группы сальмонелл характерно наличие определенного О-АГ (полисахарида) — у группы А

— это фактор 2, у группы В — фактор 4 и т.д. У R-форм бактерий О-АГ теряет боковые цепи

полисахарида и типоспецифичность.

Липид А — содержит глюкозамин и жирные кислоты. Он обладает сильной адьювантной, неспецифической иммуностимулирующей активностью и токсичностью. В целом ЛПС является эндотоксином. Уже в небольших дозах вызывает лихорадку из-за активации макрофагов и выделения ими ИЛ1, ФНО и других цитокинов, дегрануляцию гранулоцитов, агрегацию тромбоцитов. Он может связываться с любыми клетками организма, но особенно с макрофагами. В больших дозах угнетает фагоцитоз, вызывает токсикоз, нарушение функции сердечнососудистой системы, тромбозы, эндотоксический шок. ЛПС некоторых бактерий входит в состав иммуностимуляторов (продигиозан,

пирогенал). Пептидогликаны клеточной стенки бактерий обладают сильным адьювантным эффектом на клетки СИ.

Н-АГ входит в состав бактериальных жгутиков, основа его — белок флагеллин. Термолабилен.

К-АГ — это гетерогенная группа поверхностных, капсульных АГ бактерий.

Они находится в капсуле. Содержат главным образом кислые полисахариды, в состав которых входят галактуроновая, глюкуроновая и идуроновая кислоты. Встречаются вариации в строении этих антигенов, на основании чего, например, различают 75 типов (серотипов) пневмококков, 80 типов клебсиелл и т.д. Капсульные антигены используются для приготовления вакцин менингококков, пневмококков, клебсиелл. Однако, введение высоких доз полисахаридных антигенов может вызвать толерантность.

Антигенами бактерий являются также их токсины, рибосомы и ферменты.

Некоторые микроорганизмы содержат перекрестнореагируюшие — антигенные детерминанты встречающиеся у микроорганизмов и человека/животных.

У микробов различных видов и у человека встречаются общие, сходные по строению АГ. Эти явления называются антигенной мимикрией. Часто перекрестнореагируюшие антигены отражают филогенетическую общность данных представителей, иногда являются результатом случайного сходства конформации и зарядов — молекул АГ.

Например, АГ Форсмана содержится в эритроцитах барача, сальмонеллах и у морских свинок.

Гемолитические стрептококки группы А содержат перекрестно реагирующие АГ (в частности, М-протеин), общие с АГ эндокарда и клубочков почек человека. Такие бактериальные антигены вызывают образование антител, перекрестно реагирующих с клетками человека, что приводит к развитию ревматизма и постстрептококкового гломерулонефрита.

У возбудителя сифилиса есть фосфолипиды, сходные по строению с теми, которые имеются в сердце животных и человека. Поэтому кардиолипиновый антиген сердца животных используется для выявления антител к спирохете у больных людей (реакция Вассермана).

Среди бактериальных антигенов выделяют гак называемые протективные или антигены главного действия, защитные антигены. Выработанные на них антитела защищают организм от данного микроба. Очищенные протективные антигены могут быть «идеальными» вакцинными препаратами.

  1. Антитела, структурно-функциональная организация молекулы, свойства. Моноклональньве антитела, принцип получения, применение. Антимдиотинические антитела.

То- же что и в 16…

  1. Классы иммуноглобулинов, жарактеристика. Субклассы, аллотипы, изотипы, идиотины иммуноглобулинов.

Антитела — иммуноглобулины, продуцируемые В-лимфоцитами (плазматическими клетками). Мономеры иммуноглобулинов состоят из двух тяжелых (Н-цепи) и двух легких (L-цепи) полипептидных цепей, связанных дисульфидной связью. Эти цепи имеют константные (С) и вариабельные (V) участки. Папаин расщепляет молекулу иммуноглобулина на два одинаковых

антигенсвязывающих фрагмента — Fab (Fragment anligen binding) и Fc (Fragmenl crislalhzable).

 

Иммуноглобулины подразделяют на классы в зависимости от структуры, свойств и антигенных особенностей их легких и тя­желых цепей. Легкие цепи в молекулах иммуноглобулинов пред­ставлены двумя изотипами—ламбда (λ) и каппа (κ), которые различаются по химическому составу как вариабельных, так и константных участков, в частности наличием модифицированной аминогруппы на N-конце х-цепи. Тяжелые цепи иммуноглобули­нов подразделены на 5 изотипов (γ, μ, α, β, ε), которые опреде­ляют их принадлежность к одному из 5 классов иммуноглобу­линов: G, M, A, D, Е соответственно. Они отличаются друг от друга физико-химическими особенностями и биологическими свойствами.

Таким образом, в состав разных классов иммуноглобулинов входят легкие и тяжелые цепи, которые относятся к разным изотипическим вариантам иммуноглобулинов.

Наряду с ними имеются аллотипические вари­анты (аллотипы) иммуноглобулинов, несущие индивидуаль­ные антигенные генетические маркеры. Это объясняется нали­чием в плазмоцитах аллельных генов, контролирующих синтез того или другого аллотипа иммуноглобулина. Каждая плазма­тическая клетка продуцирует антитела одного аллотипа.

Наличием специфического для каждого иммуноглобулина антигенсвязывающего участка, образованного гипервариабель­ными доменами легкой и тяжелой цепи, обусловлены их различ­ные антигенные свойства. Эти различия положены в основу деления иммуноглобулинов на идиотипы. V-домены разных по своей специфичности иммуноглобулинов можно различить и по их антигенным свойствам (идиотипам). Накопление любых анти­тел, несущих в структуре своих активных центров новые для организма антигенные эпитопы (идиотипы), приводит к индукции иммунного ответа на них с образованием антител, получив­ших название антиидиотипических

 

Свойства Ig Классы Ig
IgG IgM IgA IgD IgE
Молекулярная масса, тыс дальтон 160 900 170-350 160 190
Скорость седиментации, S 7 19 7-13 7 8
Количество мономеров 1 5 1,2,4 1 1
Период полураспада, сут 21 5 6 3 2
Термостабильность + + +
Содержание в сыворотке крови г/л 12 1 2.5 0.03 0.00025
Скорость биосинтеза, мг/кг массы в день 32 7 30 0.4 0.002
Прохождение через плаценту +
Связывание и активация комплемента по классическому пути + +
Нейтрализация токсинов + + +
Агглютинация, преципитация АГ + +
Бактериолиз, опсонизация антигена + +
Цитофильность +- + ? +

 

 

 

  1. Механизмы взаимодействия антигенов и антител. Специфичность. Фазы. Проявления. Афинность. Авидность.

Антитела обладают способностью отличать один антиген от другого. Они взаимодействуют только с теми антигенами (за редким исключением), против которых они выработаны и подходят к ним по пространственной структуре. Эта способность антитела получила название комплиментарное™. Специфичность антитела обусловлена химической структурой, пространственным рисунком антидетерминант. Она связана с первичной структурой (чередованием аминокислот) белковой молекулы антитела.

Тяжелые и легкие цепи иммуноглобулинов обусловливают специфичность активного центра. В формировании комплекса антиген-антитело участвуют возникающие между ионными группами кулоновские силы и силы притяжения Ван-Дер-Ваальса, полярные силы и силы Лондона, межатомные ковалентные связи.

Известно, что взаимодействуют они как целые молекулы. Поэтому на одну молекулу антигена приходится значительное количество молекул антител. Они создают слой толщиной до 30 А0. Комплекс антиген-антитело разъединим с сохранением первоначальных свойств молекул. Первая фаза соединения антитела с антигеном неспецифическая, невидимая, характеризуется абсорбцией антитела на поверхности антигена или гаптена. Протекает при температуре 37°С за несколько минут. Вторая фаза специфическая, видимая, завершается феноменом агглютинации, преципитации или лизиса. В этой фазе необходимо присутствие электролитов, а в некоторых случаях и комплемента. Несмотря на обратимость процесса, комплексообразование между антигеном и антителом играет положительную роль в защите организма, которая сводится к опсонизации, нейтрализации, иммобилизации и ускоренной элиминации антигенов.

  • Аффинность антител — сила связывания отдельной детерминаты (эпитопа)антигена с определенным активным центром- комбинаторным участком молекулы иммуноглобулина ( паратопом). Авидность антител — кумулятивная сила связывания комбинаторных участков антител (паратопов) с антигенными детерминантами (эпитопами) сложного антигена.
  1. Серологический метод исследования. Задачи, этапы, оценка. Титр сыворотки, диагностический титр. Диагностикумы, диагностические сыворотки, применение. Характеристика серологического метода исследования

Серологическим называют метод исследования, в основе которого лежит реакция специфического взаимодействия антигенов и антител. На основе ее специфичности возможно определение неизвестных антител при взаимодействии с известным антигеном или неизвестного антигена по связыванию с известным антителом. Метод решает следующие задачи:

  1. I. Серологическая диагностика инфекционных и иммунных заболеваний, основанная на обнаружении в сыворотке крови больных антител. Обоснованием для постановки диагноза является:

а) обнаружение антител к возбудителю болезни ц диагностическом титое. т.е. в таком разведении сыворотки, в котором реакция может бытьположительна только у больных и отрицательна у здоровых;

б) нарастание титра антител при повторном исследовании в динамикеболезни, что позволяет отличить заболевание от поствакцинального илипостинфекционного иммунитета. 2/Серологическая диагностика инфекционных заболеваний, основанная на обнаружении в биологических жидкостях или тканях антигенов патогенных микробов.

  1. Серологическая идентификация неизвестных микробов, выделенных при бактериологическом методе диагностики инфекционных болезней. Обоснованием для отнесения микроба к определенной серофуппе, сёроварианту или виду является:

а) взаимодействие микроба с адсорбированной моноспецифической сывороткой, содержащей антитела только к-специфическим для микроба антигенам (из таких сывороток в процессе их производства сорбируются антитела к групповым антигенам);

б) взаимодействие микроба с моноклональными антителами, полученными методом гибридомной техники, т.е. метода культивирования гибрада из плазматической клетки, синтезирующей антитела одной специфичности, с опухолевой клеткой, способной к длительному размножению в культуре ;

в) взаимодействие микроба с диагностической сывороткой в разведении, составляющем не менее половины титра этой сыворотки.

Определение активности поствакцинального или постинфекционного индивидуального или коллективного иммунитета.

Получение и определение титров иммунных диагностических, лечебных и профилактических сывороток, поли- и гамма-глобулинов.

Терминология.

Диагностическая сыворотка — иммунная сыворотка, содержащая антитела известной специфичностити в известном титре, и предназначенная для серологической идентификации микроба или для обнаружения антигенов в организме больного,

Диагностикум — взвесь известных микробов или антигенов, предназначенных для серологической диагностики заболеваний по обнаружениюантител в сыворотке больного.

Серологический метод исследования включает ряд реакций: агглютинации, преципитации, связывания комплемента, иммунофлюоресценции, иммуиоферментного и радиоиммунологического анализа.

ОЦЕНКА МЕТОДА

Достоинства: высокая специфичность, относительная простота, доступность, безопасность, быстрота (от 10 мин. до 4 часов) получения результатов.

Недостатки: при острых инфекционных заболеваниях обнаружение антител часто бывает

ретроспективным диагнозом, т.к. они появляются в достаточных титрах к 7-8 дню от начала болезни, и к этому сроку болезнь может закончиться.

  1. Реакция агглютинации. Цели и методы постановки, учёт, оценка. Применение

Реакция агглютинации (от лат. agglutinatio — склеивание) — склеивание корпускул (бактерий, эритроцитов и др.) антителами в присутствии электролитов — натрия хлорида.

Реакция агглютинации проявляется в виде хлопьев или осадка, состоящих из корпускул (например,

бактерий), «склеенных» антителами.

РА используют для:

Определения возбудителя, *1;

Определения антител в сыворотке крови больного

Методы постановки:

Реакция агглютинации на стекле. К капле агглютинирующей сыворотки (разведение 1 : 20) добавляют взвесь бактерии, выделенных от больного. Образуется хлопьевидный осадок.

Развернутая реакция агглютинации с сывороткой крови. К разведениям сыворотки добавляют диагностикум.

  1. Реакция пассивной гемагглютинации, ингредиенты Методика постановки, учёт, оценка. Применение. Реакция обратной пассивной гемагглютииации. Реакция латексагглютинации

В РПГА выявляют антитела сыворотки крови с помощью антигенного эритроцитарного диагностикума, который представляет собой эритроциты с адсорбированными на них антигенами. Эритроциты (или частицы латекса) с адсорбированными на них антигенами взаимодействуют с соответствующими антителами сыворотки крови, что вызывает склеивание и выпадение эритроцитов на дно пробирки или ячейки в виде фестончатого осадка. При отрицательной реакции эритроциты оседают в виде пуговки. В РОПГА применяют антительный эритроцитарный диагностикум — эритроциты, на которых адсорбированы антитела.

  1. Реакция преципитации. Цели и методы постановки, учёт, оценка Применение.

Реакция преципитации — РП (от лат praecipilo осаждать) — это формирование и осаждение комплекса растворимого молекулярного антигена с антителами в виде помутнения, называемого преципитатом. Он образуется при смешивании антигенов и антител в эквивалентных количествах, избыток одного из них снижает уровень образования иммунного комплекса.

Реакцию преципитации ставят в пробирках (реакция кольцепреципитации), в гелях, питательных средах и др. Широкое распространение получили разновидности реакции преципитации в полужидком геле агара или агарозы двойная иммунодиффузия по Оухтерлони, радиальная иммунодиффузия, иммуноэпектрофорез и др.

Реакция кольцепреципитации. Реакцию проводят в узких преципитационных пробирках: на иммунную сыворотку наслаивают растворимый антиген. При оптимальном соотношении антигена и антител на границе этих двух растворов образуется непрозрачное кольцо преципитата.

Реакция двойной иммунофиффузиии по Оухтерлони. для постановки реакции растопленный агаровый гель тонким слоем выливают на стеклянную пластинку и после затвердевания в нем вырезают лунки. В лунки геля раздельно помещают антигены и иммунные сыворотки, которые диффундируют навстречу друг другу. В месте встречи в эквивалентных соотношениях они образуют преципитат в виде белой полосы. У многокомпонентных систем между лунками с антигенами и антителами появляется несколько линий преципитата; у идентичных АГ линии преципитата сливаются; у неидентичных АГ — . пересекаются.

Реакция радиальной иммунодиффузии. Иммунную сыворотку с расплавленным агаровым гелем равномерно наливают на стекло. После застывания в геле делают лунки, в которые помещают антиген в различных разведениях. Антиген, диффундируя в гель, образует с антителами кольцевые зоны преципитации вокруг лунок. Диаметр кольца преципитации пропорционален концентрации антигена. Реакцию используют для определения в сыворотке крови иммуноглобулинов различных классов, компонентов системы комплемента и др. Иммуноэлектрофорез — сочетание метода электрофореза и иммунопреципитации: смесь антигенов вносится в лунки геля и разделяется в геле с помощью электрофореза, затем в канавку параллельно )

зонам электрофореза вносят иммуннук сыворотку, антитела которой диффундируют в гель и образуют в месте «встречи» с антигеном линии преципитации.

  1. Реакция иммунофлюоресценции, прямой и непрямой методы. Применение.

Реакция иммунофлюоресценции — РИФ (метод Кунса).Различают три разновидности метода прямой, непрямой, с комплементом. Реакция Кунса является методом экспресс-диагностики для выявления антигенов микробов или определения антител.

Прямой метод РИФ основан на том, что антигены тканей или микробы, обработанные иммунными сыворотками с антителами, меченными флюорохромами, способны светиться в УФ-лучах люминесцентного микроскопа. Бактерии в мазке, обработанные такой люминесцирующей сывороткой, светятся по периферии клетки в виде каймы зеленого цвета.

Непрямой метод РИФ заключается в выявлении комплекса антиген — антитело с помощью

антиглобулиновой (против антитела) сыворотки, меченной флюорохромом. Для этого мазки из взвеси микробов обрабатывают антителами антимикробной кроличьей диагностической сыворотки. Затем антитела, не связавшиеся антигенами микробов, отмывают, а оставшиеся на микробах антитела выявляют, обрабатывая мазок антиглобулиновой (антикроличьей) сывороткой, меченной

флюорохромами. В результате образуется комплекс микроб + антимикробные кроличьи антитела +антикроличьи антитела, меченные флюорохромом. Этот комплекс наблюдают в люминесцентном

микроскопе, как и при прямом методе.

  1. Иммуноферментный анализ Ингредиенты, постановка, учёт, оценка. Области применения.

I Радиоиммунный анализ.

Радиоиммунный метод, или анализ (РИА), — высокочувствительный метод, основанный на реакции антиген — антитело с применением антигенов или антител, меченных радионуклидом (125J, 14С, ЗН, 51Сг и др.). После их взаимодействия отделяют образовавшийся радиоактивный иммунный комплекс и определяют его радиоактивность в соответствующем счетчике (бета- или гамма-излучение). Интенсивность излучения прямо пропорциональна количеству связавшихся молекул антигена и антител.

Иммуиоферментный анализ, или метод (ИФА) — выявление антигенов с помощью соответствующих им антител, конъюгированных с ферментом-меткой (пероксидазой хрена, бета-галактозидазной и или щелочной фосфатазой). После соединения антигена с меченой ферментом иммунной сывороткой в смесь добавляют субстрат/хромоген. Субстрат расщепляется ферментом и изменяется цвет продукта реакции — интенсивность окраски прямо пропорциональна количеству связавшихся молекул антигена и антител. ИФА применяют для диагностики вирусных, бактериальных и паразитарных болезней, в частности для диагностики сальмонеллеза, микоплазмозов и др., а также определения гормонов, ферментов, лекарственных препаратов и других биологически активных веществ, содержащихся в исследуемом материале в минорных концентрациях-1010 -1012 г/л. Твердофазный ИФА — вариант теста, когда один из компонентов иммунной -реакции (антиген или антитело) сорбирован на твердом носителе, напр., в лунках планшеток из полистирола. Компоненты выявляют добавлением меченых антител или антигенов. При положительном результате изменяется цвет хромогена. Каждый раз после добавления очередного компонента из лунок удаляют не связавшиеся реагенты путем промывания.

добавляют сыворотку крови больного, антиглобулиновую сыворотку, меченную ферментом и субстрат/хромоген для фермента.

  1. II. При определении антигена в лунки с сорбированными антителами вносят антиген (напр., сыворотку крови с искомым антигеном), добавляют диагностическую сыворотку против него и вторичные антитела (против диагностической сыворотки), меченные ферментом, а затем субстрат/хромоген для фермента.
  2. Реакции иммунного лизиса, применение. Реакция связывания комплемента. Ингредиенты, постановка, учёт, оценка. Применение.

Реакция связывания комплемента (РСК) заключается в том, что при соответствии друг другу антигенов и антител они образуют иммунный комплекс, к которому через Fc-фрагмент антител присоединяется комплемент (С), те происходит связывание комплемента комплексом антиген — антитело. Если же комплекс антиген — антитело не образуется, то комплемент остается свободным. РСК проводят в две фазы 1 -я фаза — инкубация смеси, содержащей антиген + антитело + комплемент, 2-я фаза (индикаторная) — выявление в смеси свободного комплемента путем добавления к ней гемолитической системы, состоящей из эритроцитов барана, и гемолитической сыворотки, содержащей антитела к ним. В 1-й фазе реакции при образовании комплекса антиген — антитело происходит связывание им комплемента, и тогда во 2-й фазе гемолиз сенсибилизированных антителами эритроцитов не произойдет (реакция положительная). Если антиген и антитело не соответствуют друг другу (в исследуемом образце нет антигена или антитела), комплемент остается свободным и во 2-й фазе присоединится к комплексу эритроцит — антиэритроцитарное антитело, вызывая гемолиз (реакция отрицательная).

 

  1. Динамика формирования клеточного иммунного ответа, его проявления. Иммунологическая
    память.

Ответ иммунный клеточный (КИО) — сложная, многокомпонентная кооперативная реакция иммунной системмы, индуцированная чужеродным антигеном (Т-клеточными эпитопами). Реализуется Т-системой иммунитета. Этапы КИО

  1. захват антигена АПК
  2. Процессир. АГ в протеосомах.
  3. Образование комплекса пептид+ ГКГ I и II класса.
  4. Транспортировка комплемента на мембрану АПК.
  5. Распознавание комплемента АГ-специфическими Т-хелперами 1
  6. активация АПК и Т-хелперов 1, выделение Е-хелперами1 ИЛ-2 и гамма – интерферона. Пролиферация и дифференцировка в области АГ-зависимых Т-лимфоцитов.
  7. Образование зрелых Т-лимфоцитов разных популяций и Т-лимфоцитов памяти.
  8. Взаимодействие зрелых Т-лимфоцитов с АГ и реализация конечного эффектора.

Проявления КИО:

противоинфекционный ИО:

противовирусный,

противопаразитарный,

противобактериальный (внутриклеточно расположенные бактерии);,

аллергии IV и I типов;

противоопухолевый ИО;

трансплантационный ИО;

иммунологическая толерантность;

иммунологическая память;

аутоиммунные процессы.

 

  1. Характеристика регуляторных и эффекторных субпопуляций Т-лимфоцитов. Основные
    маркёры. Т-клеточный рецептор (ТКР). Генетический контроль разнообразия ТКР

Т-лимфоциты представляют вторую важную популяцию лимфоцитов, предшественники которых образуются в костном мозге и затем мигрируют для дальнейшего созревания и

дифференцировки в тимус (название «Т-лимфоцит» отражает тимусзависимость, как основное место раннего этапа созревания).

По спектру биологической активности Т-лимфоциты являются регуляторными и эффекторными клетками, обеспечивающими адаптационную функцию Т-системы иммунитета. Они не продуцируют молекул антител. ТКР является мембранной молекулой, отличающейся от ВКР, но структурно и функ­ционально близкой к антителам.

TCR – АГ-специф. рецептор. Это главная молекула, относящаяся к суперсемейству Ig. Она имеет 3 части: надмембранную, мембранную и цитоплазматическую. Хвост TCR формируют 2-е глобулярные молекулы альфа и бета, которые имеют вариабульные и константные домены (Vα и Vβ, Сα и Сβ).

Vα и Vβ формируют активный комплекс TCR. Там есть 3 гипервариабельных участка – константнодетерминированные области (КДО). Функция КДО — распознавание и связывание Т-клеточных пептидов, т.е. детерминантных групп АГ. TCR плотно сидит на клетке и его цитоплазматический хвост, его цитоплазматическая часть, учавствует в проведении инф. В ядро при его взаимодействии с АГ. Примерно 90 % TCR. Несут цепи альфа и бета, а примерно 10% несут цепи гамма и дельта.

TCR кодируется генетически. α и γ цепи по аналогии с легкими цепями ИГ кодируются V,G и C – генами, а β и δ по аналогии с тяжелыми цепями ИГ — V,G,E. α и γ в 7-й хромосоме, а β и δ в 14.

CD-3 рецептор – это комплементарная структура, Ig молекула. Она образована 3-мя трансмембранными белками: εδ, εγ и димер-дзета., надмембранный, vембранный и цитозолный хвост. Они с TCR представляют единый комплекс, Который обеспечивает проведение АГ –специфических сигналов в ядро клетки

СD4 и СD8. Они экспрессируют или одновременно с TCR или отдельно от него. Играют функцию ко-рецепторов. Они усиливают адгезию с АГ-презентирующей клеткой. Обеспечивают проведение АГ-специфического сигнала в ядро клетки.

Т-лимфоциты разделены по типу разпозн, МОЛЕКУЛ:

СD4 распозн. Пептид ГКГ 2-го класса

СD8 пептид + ГКГ 1-го класса

СD2

Характеристика основных субпопуляций Т-лимфоцитов: популяцию Т-лимфоцитов можно классифицировать на три класса:

  1. Хелперы, эффекторы ГЗТ (CD 4+) и Супрессоры-цитотоксические (CD 8+);
  2. Нестимулированные (CD 45 RA+) и клетки памяти (CD 45 RO+);
  3. Тип 1 — (ИЛ-2, ИНФ-гамма, ТНФ-бэта продуцирующие);
    Тип 2 — (ИЛ-4, ИЛ-5, ИЛ-6, ИЛ9, ИЛ 10 продуцирующие).

 

 

 

  1. Активация Т-лимфоцинтов. Костимуляция. Модель двух сигналов. Анергия. Апоптоз
  2. Мембранные процессы, связ. с разпозн. Т-лимф. Пептид+ГКГ Iили II.
  3. Цитозольные хвосты связаны с протеинкиназами. Сигнал при расп. АГ с мембр. клетки усиливается, запускается каскад протеинкиназ, вовлекается фосфолипаза С, идет активация белкв, которые связаны с ДНК Т-лимфоцита.
  4. Клетки вырабатывают ИЛ-2 под действием которого примерно через 12 часов клетки трансформируются в бласты. Пролиферация идет дальше и бласты дифференцируются в зрелые Т-лимфоцитные клетки.

 

 

Анергия — полная или частичная утрата организмом специфической иммунологической реактивности (обычно в форме гиперчувствительности замедленного типа). Выявляется с помощью внутрикожных тестов на анамнестические антигены. Дает отрицательные результаты, к примеру, при ВИЧ-инфекции, у больных туберкулезом, лепрой, у онкобольных. При анергии отмечается отрицательный или сниженный пролиферативный ответ CD4+ Т-лимфоцитов на специфические антигены и митогены in vitro и in vivo. Различают центральную и периферическую анергию. Последняя выражается полной или частичной утратой способности ИКК к активации вследствие блокирования антигенспецифических рецепторов, повреждения механизмов костимуляции

Апоптоз —механизм запрограммированной гибели одной клетки или группы клеток многоклеточного организма. Сигналы, запускающие механизмы апоптоза, активи­руют ферменты, которые вызывают фрагментацию ДНК на участки 50-300 п.н. и разрушение клетки. После этого начинаются фагоцитоз и элиминация апоптозных телец макрофагами. Признаками апоптоза являются уменьшение размеров клетки, уплотнение и фрагментация хроматина, скопление его возле ядерной мембраны, уменьшение объема цитоплазмы. При этом гибель клеток не сопровождается воспалением и повреждением тканей. Апоптоз индуцируется большинством веществ (в малых концентрациях), вызывающих некроз, а также сигналами, поступающими от регуляторных клеточных молекул (гормонов, цитокинов, антигенов, суперантигенов, моноклонштьных антител).

Противоположным апоптозу процессом является некроз — повреждение нормальных тканей

 

  1. Методы определения количества и функциональной активности Т-лимфоцитов
  2. определение Е-розеток основано на наличии на мембране Т-лимфорецепторов к эритроцитам барана При смешивании лимфоцитов крови человека и эритроцитов барана образуются «розетки» — лимфоцит с прилипшими к нему 3 и более эритроцитами
  3. кожно-аллергические пробы с соответствующими антигенами или веществами, имитирующими антигены (фитогемагглютинин), которые названы мутагенами;
  4. реакция бластной трансформации лимфоцитов с фитогешгглютинлном или соответствующими антигенам проявляется в превращении лимфоцитов в более крупные молодые клетки — бласты, число которых подсчитывается в препарате на 200 лимфоцитов.
  5. реакция подавления миграции макрофагов или гранулоцитов под действием фактора, продуцируемого Т-лямфоцитами при взаимодействии со специфическим антигеном. Лимфоциты человека смешивают с предполагаемым антигеном, а через 18 часов в каплю полученной культуральной жидкости опускают капилляр, наполненный подвижными макрофагами или гранулоцитами и через, сутки измеряют степень их миграции из опытного и контрольного (без антигена) капилляров. Их отношение называется индексом подавления миграции.
  6. определение цитотоксичности Т-киллеров выявляется при взаимодействии лимфоцитов больного с клетками-мишенями, т.е. клетками, выдавшими их образование. Подсчитывается количество погибших клеток.

 

  1. Местный иммунитет, значение Основные компоненты.

Иммунная система слизистой оболочки (ИССО) является особым и самостоятельным компонентом иммунной системы организма человека и отличается от лимфоидной ткани периферических отделов тем, что способствует проникновению в циркуляторное русло различных изотопов антител. Более того, регуляция ИССО отличается от таковой в периферической лимфатической ткани (последнюю часто называют «системной иммунной системой»). В ИССО можно выделить индукторные зоны, где антиген или вакцина распознаются, фагоцитируются и презентируются В- и Т-клеткам, и другие области организма, в которых иммунокомпетентные клетки выполняют свои функции (мукозальные эффекторные ткани) ). В-клетки отвечают за выработку иммуноглобулина A (IgA), главного изотипа ИССО, который, как принято считать, появляется в индукторных зонах в ответ на вдыхаемые антигены. Кроме того, при помощи Т-хелперов (Th) и цитокинов эти В-клетки в процессе иммунного ответа претерпевают изменения, заключающиеся, в частности, в их дифференцировке в клетки памяти. После миграции в эффекторные зоны, такие как собственная пластинка слизистой оболочки (СПСО) кишечника, верхних дыхательных путей (ВДП) и мочеполовой системы, В-клетки быстро трансформируются в IgA-продуцирующие плазматические клетки. Считается, что антиген-специфичные Th, такие как CD8+ цитотоксичные Т-лимфоциты (ЦТЛ) могут циркулировать между индукторными и эффекторными зонами слизистых оболочек. Специалисты, занимающиеся изучением ИССО, называют эту систему общей иммунной системой слизистых оболочек (ОИССО).

 

  1. Аллергия. Стадии аллергии. Типы аллергических реакций.

АЛЛЕРГИЯ (от греч. аllos — другой) — форма иммунного ответа, специфическая повышенная чувствительность организма к аллергену (антигену) в результате неадекватной реакции иммунной системы на повторный контакт с аллергеном, что приводит к повреждению тканей.

СТАДИИ АЛЛЕРГИЧЕСКОЙ РЕАКЦИИ

 

  • СЕНСИБИЛИЗАЦИЯ – переход от нормальной реактивности к повышенной к какому-либо аллергену. Формируется около 2-х недель. Сохраняется от дней до многих лет и даже всю жизнь. Может формироваться активно и создаваться пассивно.
  • РАЗРЕШЕНИЕ – стадия клинических проявлений. Развивается в основном на повторное попадание аллергена или (реже) на аллерген, который сохраняется в организме более 2-х недель. Стадия клинических проявлений: два типа – гиперчувствительность немедленного типа (ГНТ) и гиперчувствительность замедленного типа (ГЗТ).
  • ДЕСЕНСИБИЛИЗАЦИЯ – возврат к нормальной реактивности, который может произойти: спонтанно – после устранения действия аллергена и искусственно – после курса введения аллергена в малых дозах.
  • ГНТ — гиперчувствительность, обусловленная антителами (IgЕ,IgG,IgM) против аллергенов. Развивается через несколько минут или часов после повторного воздействия аллергена: расширяются сосуды, повышается их проницаемость, развиваются зуд, бронхоспазм, сыпь, отеки. Поздняя фаза ГНТ дополняется действием продуктов эозинофилов и нейтрофилов.
  • К ГНТ относятся следующие типы реакций :
  • I тип — медиаторный (анафилактический)
  • II тип — цитотоксический
  • III тип – иммунокомплексный

ГИПЕРЧУВСТВИТЕЛЬНОСТЬ ЗАМЕДЛЕННОГО ТИПА (IV ТИП)

  • Развивается по механизму клеточного иммунного ответа. Обусловлена (фаза сенсибилизации) взаимодействием аллергена с макрофагами и Тh1-лимфоцитами, стимулирующими клеточный иммунитет, заканчивающийся образова-нием Т-эффекторов и Т-киллеров.
  • Аллергенами чаще всего являются: простые химические в-ва (гаптены), микробные аллергены, лекарства, аутоаллергены.
  • Фаза разрешения развивается через 1—3 суток после повторного попадания аллергена.

 

  1. Аллергены, определение, классификация, характеристика.

АЛЛЕРГЕНЫ – химические в-ва любой природы, которые при попадании в организм вызывают сенсибилизацию к ним.

  1. I. Экзоаллергены

По механизму проникновения:

1.Контактный

2.Игаляторный

3.Алиментарный

4.Парентеральный

 

По происхождению

1.Бытовые

2.Эпидермальные

3.Пыльцевые

4.Химические в-ва

5.Лекарственные

6.Пищевые

7.Микробные

 

  1. II. Эндоаллергены

 

Характеристика.

Ингаляционные а) растительного происхождения (пыльца растений)

б) животного происхождения (эпидермальные антигены, антигены клещей и др)

в) бытовые аллергены (пыль и др.)

Пищевые яйца, молоко, сыр, рыба, мясо, шоколад, ракообразные, моллюски, рыба, бобовые, орехи, ягоды, зелень, пряности, овощи, грибы, пищевые добавки и смеси
Лекарственные антибиотики, сульфаниламиды, гормоны (инсулин, АКТГ, сыворотки, витамины (тиамин и др.), ферменты и др.
Микробные вирусы, бактерии, грибы, простейшие
Промышленные полимеры, пестициды, металлы и др.

 

 

  1. Аллергические реакции гиперчувствительности немедленного типа (ГНТ), виды, клинические проявления

 

ГИПЕРЧУВСТВИТЕЛЬНОСТЬ НЕМЕДЛЕННОГО ТИПА

 

  • ГНТ — гиперчувствительность, обусловленная антителами (IgЕ,IgG,IgM) против аллергенов. Развивается через несколько минут или часов после повторного воздействия аллергена: расширяются сосуды, повышается их проницаемость, развиваются зуд, бронхоспазм, сыпь, отеки. Поздняя фаза ГНТ дополняется действием продуктов эозинофилов и нейтрофилов.
  • К ГНТ относятся следующие типы реакций :
  • I тип — медиаторный (анафилактический)
  • II тип — цитотоксический
  • III тип – иммунокомплексный

I ТИП ГНТ (МЕДИАТОРНЫЙ)

 

  • Возникает на экзогенные Т-зависимые аллергены (лекарственные, пищевые, пыльцевые, микробные).
  • При первичном контакте с аллергеном образуются IgE, концентрация которого превышает в 20-40 раз норму. IgE прикрепляются Fс-фрагментом к тучным клеткам и базофилам шоковых органов (слизистые оболочки, соединительная ткань разных органов).
  • Повторно введенный антиген перекрестно связывается с IgЕ на клетках, вызывая их дегрануляцию, выброс гистамина и других медиаторов аллергии.

II ТИП ГНТ (ЦИТОТОКСИЧЕСКИЙ)

 

  • Развивается на простые химические вещества, лекарства, бактериальные, вирусные антигены, которые сорбируются или связываются мембранами клеток, а также аутоантигены.
  • При первичном контакте с аллергеном образуются антитела классов IgG и IgM, способные активировать систему комплемента по классическому пути.
  • На стадии разрешения аллерген, расположенный на клетке «узнается» указанными антителами. При взаимодействии «клетка-антиген-антитело» происходит активация комплемента и разрушение клетки (комплементзависимый цитолиз).
  • Помимо комплементзависимого цитолиза лизис клеток-мишеней может так же быть вызван фагоцитами и естественными киллерами, несущими на мембране рецепторы к Fc фрагменты антитела

III ТИП ГНТ (ИММУНОКОМПЛЕКСНЫЙ)

 

  • Развивается на многие гетеро-, алло-, и аутоаллергены, длительно и в больших количествах циркулирующих в организме. Может быть обусловлена многими микроорганизмами и имеет место при хронических бактериальных, вирусных, грибковых, протозойных инфекциях.
  • При первичном контакте с аллергеном синтезируются антитела классов IgG, IgM, IgA.
  • На стадии разрешения антитела образуют с растворимыми антигенами иммунные комплексы, которые активируют комплемент. При избытке антигенов или недостатке комплемента иммунные комплексы откладываются на стенке сосудов, базальных мембранах, т. е. структурах, имеющих Fс-рецепторы. Развивается воспалительная реакция.

 

 

  1. Медиаторный (I) тип ГНТ, механизмы, клинические проявления. Способы предупреждения.

I ТИП ГНТ (МЕДИАТОРНЫЙ)

 

  • Возникает на экзогенные Т-зависимые аллергены (лекарственные, пищевые, пыльцевые, микробные).
  • При первичном контакте с аллергеном образуются IgE, концентрация которого превышает в 20-40 раз норму. IgE прикрепляются Fс-фрагментом к тучным клеткам и базофилам шоковых органов (слизистые оболочки, соединительная ткань разных органов).
  • Повторно введенный антиген перекрестно связывается с IgЕ на клетках, вызывая их дегрануляцию, выброс гистамина и других медиаторов аллергии.

 

СТАДИЯ РАЗРЕШЕНИЯ I ТИПА ГНТ

 

  • Иммунологическая фаза — При повторном поступлении аллергена на тучных клетках и базофилах образуются комплексы аллерген-IgE, вызывающие изменения свойств ЦПМ.
  • Патохимическая фаза – наступает после дегрануляции базофилов и тучных клеток. Из гранул в ткани выбрасы-ваются биологически активные медиаторы: гистамин, серотонин, ацетилхолин, гепарин, лейкотриены, простагландины, ферменты и цитокины (ИЛ-3, ИЛ-4, ИЛ-5, ИЛ-6, ИЛ-13, ФНО-альфа).
  • Патофизиологическая фаза – Перечисленные компоненты вызывают сокращение гладких мышц, ослабление сердечной деятельности, развитие коллапса, повышение сосудистой проницаемости, отек, зуд и т. д.

 

 

Клинические проявления гиперчувствительности 1 типа

 

  • Атопия — наследственная предрасположенность к развитию ГНТ, обусловленная повышенной выработкой IgЕ-антител к аллергену, повышенным количеством Fс-рецепторов для этих антител на тучных клетках, особенностями распределения тучных клеток и повышенной проницаемостью тканевых барьеров. Формы атопий – бронхиальная астма, крапивница, сенная лихорадка (аллергический ринит), отек Квинке, детская экзема.
  • Анафилактический шок – алергенами чаще выступают лекарства, яд пчел. Протекает остро с развитием коллапса, отеков, спазма гладкой мускулатуры, потерей сознания, часто заканчивается смертью.
  • 1 тип гиперчувствительности можно пассивно перенести с помощью антител.

КОЖНЫЕ ПРОБЫ С АТОПИЧЕСКИМИ АЛЛЕРГЕНАМИ

  • Скарификационная кожная проба. Аллергены – пыльцевые, бытовые, пищевые, эпидермальные и др.
  • Реакцию учитывают через 15—20 мин после внесе-ния в царапину аллергена: при положительной реакции появляется волдырь (от 2 до 10 мм и более) с гиперемией; при отрицательной реакции — волдырь, выраженная гиперемия отсутствуют.

 

 

 

 

 

34.Цитотоксический (II) и иммунокомплексный (III) типы ГНТ, механизмы развития, проявления.

II ТИП ГНТ (ЦИТОТОКСИЧЕСКИЙ)

 

  • Развивается на простые химические вещества, лекарства, бактериальные, вирусные антигены, которые сорбируются или связываются мембранами клеток, а также аутоантигены.
  • При первичном контакте с аллергеном образуются антитела классов IgG и IgM, способные активировать систему комплемента по классическому пути.
  • На стадии разрешения аллерген, расположенный на клетке «узнается» указанными антителами. При взаимодействии «клетка-антиген-антитело» происходит активация комплемента и разрушение клетки (комплементзависимый цитолиз).
  • Помимо комплементзависимого цитолиза лизис клеток-мишеней может так же быть вызван фагоцитами и естественными киллерами, несущими на мембране рецепторы к Fc фрагменты антитела

 

СТАДИЯ РАЗРЕШЕНИЯ II ТИПА ГНТ

 

  • Иммунологическая фаза – специфические антитела классов IgG и IgM связываются своими Fab- фрагментами с аллергеном, находящимся на мембранах клеток (клетки крови, гепатоциты, клетки эндотелия сосудов, эпителия почек)
  • Патохимическая фаза – Fc-фрагменты антител активируют систему комплемента с образованием мембраноатакующего комплекса. Указанный процесс приводит к образованию С3а, с5а (анафилатоксины), Ва, перфорина и др.
  • Патофизиологическая фаза – разрушение клеток-мишеней различных органов, развитием воспаления, определенных клинических синдромов.

 

КЛИНИЧЕСКИЕ ПРОЯВЛЕНИЯ ГИПЕРЧУВСТВИТЕЛЬНОСТИ II ТИПА

 

  • Некоторые аутоиммунные болезни, обусловленные появлением аутоантител к антигенам собственных тканей: злокачественная миастения, аутоиммунная гемолитическая анемия, вульгарная пузырчатка, нефрит, аутоиммунный гипертиреоидизм, инсулинозависимый диабет II типа.
  • Лекарственно-индуцируемые гемолитическая анемия, гранулоцитопения и тромбоцитопения сопровождаются появлением антител против лекарства — гаптена и цитолизом клеток, содержащих этот антиген.

 

III ТИП ГНТ (ИММУНОКОМПЛЕКСНЫЙ)

 

  • Развивается на многие гетеро-, алло-, и аутоаллергены, длительно и в больших количествах циркулирующих в организме. Может быть обусловлена многими микроорганизмами и имеет место при хронических бактериальных, вирусных, грибковых, протозойных инфекциях.
  • При первичном контакте с аллергеном синтезируются антитела классов IgG, IgM, IgA.
  • На стадии разрешения антитела образуют с растворимыми антигенами иммунные комплексы, которые активируют комплемент. При избытке антигенов или недостатке комплемента иммунные комплексы откладываются на стенке сосудов, базальных мембранах, т. е. структурах, имеющих Fс-рецепторы. Развивается воспалительная реакция.

 

СТАДИЯ РАЗРЕШЕНИЯ III ТИПА ГНТ

 

  • Иммунологическая фаза – специфические антите-ла классов IgG, IgM, IgA образуют с циркулирующими аллергенами растворимые иммунные комплексы с осаждением последних в тканях под базальной мембраной эпителия и субэндотелиально.
  • Патохимическая фаза – активация системы комплемента по классическому и альтернативному путям, образование анафилатоксинов (С3а, С5а). Накапливаются цитокины (ИЛ-1, ИЛ-2, ФНО)
  • Патофизиологическая фаза – анафилатоксины расширяют сосуды, повышают их проницаемость, индуцируют образование на эндотелии молекул адгезии для лейкоцитов, макрофагов, которые выс-вобождают цитокины и повреждают ткани. Фиксированные иммунные комплексы вызывают воспаление.

 

КЛИНИЧЕСКИЕ ПРОЯВЛЕНИЯ ГИПЕРЧУВСТВИТЕЛЬНОСТИ III ТИПА

 

  • Реакция может быть общей (например, сывороточная болезнь) или вовлекать отдельные органы, ткани, включая кожу ( системная эритематозная волчанка, реакция Артюса), почки ( нефрит), легкие (например, аспергиллез) или другие органы.
  • Поскольку место фиксации иммунных комплексов внутренняя оболочка сосудов, то основной клинический синдром – васкулиты различной локализации.
  • Когда аллергеном являются чужеродные сыворотки, некоторые лекарства развивается сывороточная болезнь. Иммунные комплексы, откладываются в стенках кровеносных сосудов и тканях. Развиваются системные васкулиты, артриты (отложение комплексов в суставах), нефрит (отложение комплексов в почках).
  • Реакция Артюса развивается при повторном введении антигена, который локально образует иммунные комплексы с ранее накопившимися антителами. Проявляется отеком, геморрагическим воспалением и некрозом.

 

  1. Гиперчувствительность замедленного (IY) типа (ГЗТ). Виды, клинические проявления.

ГИПЕРЧУВСТВИТЕЛЬНОСТЬ ЗАМЕДЛЕННОГО ТИПА (IV ТИП)

 

  • Развивается по механизму клеточного иммунного ответа. Обусловлена (фаза сенсибилизации) взаимодействием аллергена с макрофагами и Тh1-лимфоцитами, стимулирующими клеточный иммунитет, заканчивающийся образова-нием Т-эффекторов и Т-киллеров.
  • Аллергенами чаще всего являются: простые химические в-ва (гаптены), микробные аллергены, лекарства, аутоаллергены.
  • Фаза разрешения развивается через 1—3 суток после повторного попадания аллергена.
Форма

ГЗТ

аллерген гистология клиника
Контактная Простые химв-ва (гаптены) Лимфоциты, макрофаги Контактный дерматит, экзема, отеки
Инфекционная Туберку-линовая Микробные (туберкулез, проказа, бруцеллез) Лимфоциты, моноциты, макрофаги Местный инфильтрат
Гранулема-тозная Микробные (туберкулез, проказа, сифилис) Макрофаги, эпителиоидные клетки, гигантские клетки, фиброз Гранулема, уплотнение в легких, коже и др.

 

КОНТАКТНАЯ ФОРМА ГЗТ

 

  • Контактная форма — лекарства, косметические препараты в эпидермисе кожи соединяются с белками тканей и образуют комплексный антиген. В региональных лимфоузлах происходит антигенспецифическая дифференцировка Т-лимфоцитов, их миграция в кожу и на повторное воздействие аллергена они индуцируют контактный дерматит.

 

 

ИНФЕКЦИОННАЯ ФОРМА ГЗТ

  • Туберкулиновая форма – микробные антигены индуцируют в месте нахождения микроба специфическую дифференцировку Т-лимфоцитов с дальнейшим формированием воспалительного очага, инфильтрата с преобладанием мононуклеаров. В диагностической практике используют кожноаллергические пробы с аллергенами возбудителей: туберкулином, бруцеллином и др.
  • Гранулематозная форма – развивается как продолжение туберкулиновой формы при длительном нахождении микроба в организме. Образуются гранулемы – крупные очаги инфильтративного воспаления, отграниченные от окружающей ткани. В центре гранулемы микробы, макрофаги, эпителиоидные и гигантские многоядерные клетки. По периферии пролиферируют фибробласты, секретирующие коллаген. В дальнейшем гранулема подвергается фиброзу (благоприятный исход) или распаду, некрозу (прогрессирование инфекции).
  1. Методы диагностики ГНТ (in vivo и in vitro).
  2. ГНТ медиаторного механизма (анафилаксия, атопия):

а) сбор аллергологического анамнеза ;

б) Кожно-аллергические пробы разрешены строго ограниченно и только в лечебных учреждения> Аллерген вводится цельный или разведенный в количестве 0,1 мл строго внутрикожно. Учет реак течение 0-4 часов. Реакция считается положительной, если:

на месте введения образуется везикула и эритема;

на месте введения только эритема, но с диаметром более 20 мм

имеются признаки общей реакции: головокружение, тошнота и т.д.

в) повышение количества иммуноглобулина Е в сыворотке крови;

г) повышение концентрации в сыворотке крови гистамина и др.аминов ;

д) реакция дегрануляции тучных клеток (тест Шелли): если к нормальным тучным клеткам добавить смесь сыворотки больного и аллергена то в результате фиксации иммунного комплекса + аллерген» на

рецепторах мембраны тучной клеткой наблюдается повышенная проницаемостьмембран и выбро клетки гранул с биологически активными аминами.

  1. ГНТ цитоксического типа (аутоиммунные болезни, анемии, агранулоцитоз и др.);

а) обор аллергического анамнеза;

б) кожно-аллергические пробы;

г) реакция повреждения нейтрофилов: к нейтрофилам больногодобавляем аллерген. Если на мембране нейтрофилов локализованы аллергические иммуноглобулины, то образовавшийся на мембране иммунный

комплекс «Jg G + аллерген» вызывает разрушение ее целостности.

  1. ГНТ иммунокомплексного типа:

а) сбор аллергического анамнеза;

б) определение фиксированных имглунных комплексов методом непрямой иммунофлюоресценции;

в) определение циркулирующих иммунных комплексов в сыворотке крови: они осаждаются из сыворотки при воздействии раствора полиэтиленгликоля Ш 6000. В осадке определяется количество белка и по калибровочному графику производится расчет количества ЦИК.

  1. Методы диагностики ГЗТ (in vivo и in vitro).

а)сбор аллерголоческого анамнеза;

б)кожно-аллергические пробы отличаются временем- и критериями оценки при учете: максимум их развития наблюдается через 24-48-72 часа. Реакция считается положительной при наличии инфильтрата на месте введения размером более 5 мм;

в)реакция подавления миграции макрофагов. Лимфоциты человека смешивают с предполагаемым антигеном, а через 18 часов в каплю полученной культуральной жидкости опускают капилляр, наполненный подвижными макрофагами или гранулоцитами и через, сутки измеряют степень их миграции из опытного и контрольного (без антигена) капилляров. Их отношение называется индексом подавления миграции.

г)реакция бластной трансформации лимфоцитов с фитогешгглютинлном или соответствующими антигенам проявляется в превращении лимфоцитов в более крупные молодые клетки — бласты, число которых подсчитывается в препарате на 200 лимфоцитов.

 

  1. Иммунологическая толерантность. Определение, механизмы, биологическое значение.
    Иммунологическая толерантность — неспособность организма специфически отвечать на действие антигена. Лежит в основе функционирования иммунной системы в норме и обеспечения ее ареактивности по отношению к антигенам тканей собственного организма.

Это явление было открыто П.Медаваром на мышах. В результате экспериментов оказалось, что врожденная толерантность к антигену (толерогену) возникает, когда происходит внутриутробный контакт организма с этим антигеном. В этом случае организм после рождения будет воспринимать данный АГ как «свое». В настоящее время такая толерантность объясняется тем, что в эмбриогенезе происходит гибель клонов-предшественников Т-лимфоцитов, способных взаимодействовать с толерогеном.

Кроме врожденной, существует также и приобретенная толерантность. Чаще всего это обратимый процесс. Приобретенная толерантность бывает 2-х видов’: высокодозовая и низкодозовая. Высокодозовая толерантность возникает при попадании в организм больших доз толерогена, особенно введенного на фоне подавления иммунитета (облучение, применение иммунодепресантов). Такое большое количество АГ вызывать гибель реактивных к нему лимфоцитов. Низкодозовая толерантность возникает при введении малых доз определенных АГ. Считается, что в данном случае она опосредована активацией клеток-супрессоров, подавляющих иммунную реакцию. В целом же в настоящее время оба механизма поддержания толерантности (делеция клонов и их супрессия) рассматриваются как взаимодополнияющие.

Анергия — неотвечаемость на антиген, это обычно вариант высокодозовой толерантности на фоне подавления иммунного ответа.

 

  1. Трансплантационный иммунитет. Антигены гистосовместимости I, II, III классов, роль в иммунном ответе. Типы трансплантационных реакций. Механизмы отторжения трансплантата. Предупреждение.

Трансплантационный иммунитет — состояние повышенной иммунной реактивности организма, возникающее в ответ на пересадку органа или ткани, взятых от другой, генетически отличающейся особи. Реакции трансплантационною иммунитета тем сильнее, чем больше выражены генетические различия между донором и реципиентом. Развитие Т. и. приводит к гибели пересаженной ткани. Состояние иммунитета при аллотрансплантации развивается в основном по типу гиперчувствительности замедленного типа. Повышенная чувствительность к пересаженной ткани

возникает примерно через 1—2 нед. после трансплантации и сохраняется в течение от 1 мес. до нескольких лет. На протяжении этого периода повторная трансплантация сопровождается отторжением пересаженной ткани в более короткий срок. Сенсибилизация обусловлена в первую очередь реакцией регионарных к трансплантату лимфатических узлов, через которые происходит отток лимфы от пересаженной ткани: далее включаются другие участки лимфоидной ткани хозяина. Иммунитет при_ аллотрансплантациях не обладает органной специфичностью, реакция имеет индивидуально специфический характер. Она направлена как против той ткани, которая пересаживалась, так и против других тканей того же донора. Основным клеточным компонентом при этом является Т-популяция стимулированных лимфоцитов, хотя гуморальные факторы реципиента также принимают участие в формировании трансплантационного иммунитета. В период реакции тканевой несовместимости установлено появление в крови реципиента антител, оказывающих комплементзависимое цитотоксическое, а также агглютинирующее действие на клетки донорской антигенной принадлежности. Антитела обнаружены также в трансплантате во время его гибели Полной ясности в механизме отторжения трансплантатов еще нет. Полагают, что генетически чужеродный трансплантат отторгается в результате инфильтрации пересаженной ткани лимфоцитами — Т-киллерами, которые оказывают разрушающее действие на клетки-мишени, выделяя биологически активное вещество — лимфотоксин. Разрушение лимфоцитами усиливается при воздействии иммунных антител (антителозависимый цитолиз).

В результате клеточной инфильтрации местно (в области трансплантата) достигается высокая концентрация иммунологических эффекторов, приводящая к его гибели. Иммунологическая реакция при пересадке аллогенных клеток может иметь прямо противоположную форму и исходить со стороны иммунокомпетентных клеток пересаженной ткани против организма реципиента — реакция трансплантата против хозяина (РТПХ). Эта реакция наблюдается преимущественно при трансплантации костного мозга, когда иммунная реактивность реципиента понижена.

Реакции Т. и. к пересаженным тканям и РТПХ могут быть ослаблены путем подбора донора по антигенам гистосовместимости, в результате облучения организма реципиента, применения адренокортикотропных гормонов, антиметаболитов, антилимфоцитарной сыворотки, ингибирующих различные стороны обменных процессов и оказывающих иммунодепрессивное действие.

Антигены главного комплекса гистосовместимости (МНС — Major histocompatibility complex). МНС у человека называются HLA (англ. Human leucocyte antigene). Молекулы гистосовместимости I и II классов кодируются генами системы гистосовместимости локусов А, В, С и D, которые располагаются в коротком плече 7 хромосомы. Они характеризуются выраженным разнообразием. Молекулы 1 класса состоят из тяжелой цепи (45 кДа) нековалентно связанной с В-2 микроглобулином (12 кДа). Они могут быть фиксированы на мембране клеток, так и обнаруживаться в сыворотке и других жидкостях организма. Тяжелая цепь молекулы состоит из 3-х внеклеточных доменов, обозначенных — al (N-терминальный), а2 и аЗ, трансмембранной области и цитоплаэматического хвоста. Они экспедированы как на иммунокомпетентных, так и на соматических клетках.

Выявлено участие растворимых молекул I класса в различных этапах иммунного ответа: а) связывании антиНЬАантител; б) ингибиции цитотоксичности аутореактивных Т-лимфоцитов; с) формировании иммунологической толерантности.

Молекулы II класса распознавания являются продуктами DR, DQ и DP генов, гетеродимеры тяжелой (а) и легкой (в) гликопротеидных цепей. Молекулярная масса альфа цепи 30-34 кДа, а бэта — 26-29 кда. Внеклеточная часть молекулы представлена al и а2, или в1 и в2 и соединена небольшой трансиенбранной областью (30 аминокислот) и коротким цитоплазматическин доменом (15 аминокислот). Они экспрессированы преимущественно на мембране иммунокомпетентных клеток. Антигены МНС I класса имеют все ядросодержащие клетки, а МНС II класса — только антигенпрезентирующие клетки. Антигены МНС I и II классов участвуют в презентации (представлении) клетками антигенного пептида Т-лимфоцитам: продукты МНС I класса презентируют (представляют) антигенный пептид CD8+ Т-лимфоцитам, а МНС II класса CD4+ Т-лимфоцитам. Имеются неклассические молекулы МНС, или МНС-подобные (например, CD1). Виды и механизмы реакций отторжения: раннее отторжение трансплантата

Основной механизм отторжения — клеточно опосредованный. Иммунный ответ похож на таковой при туберкулиновой пробе, вызывает разрушение трансплантата в течение дней — месяцев. Гистологически характеризуется мононуклеарной клеточной инфильтрацией трансплантата, кровоизлияниями и отеком. Из — за гипоксии нередко развивается фиброз. Такой вид отторжения можно затормозить с помощью иммуносупрессоров.

позднее отторжение трансплантата. Проявляется в основном у пациентов с ИДС. Патологическая картина отличается от (1.) тем, что вовлекается эндотелий сосудов, происходит его пролиферация с последующим сужением просвета сосудов, что приводит к ишемии и некрозу трансплантата. гипериммунное отторжение трансплантата

Проявляется в случаях, если антигены трансплантата раньше уже попадали в организм реципиента до текущей пересадки (при беременности, переливании крови, предыдущей трансплантации). Отторжение и деструкция развиваются в течение часов и даже минут. Реакция опосредована гуморально, характеризуется тромбозом мелких сосудов, инфарктом трансплантата, лизисом клеток на границе «трансплантат — хозяин». Процесс необратим и не предотвращается ни одним из известных методов иммуносупрессии.

Для предупреждения развития реакций отторжения необходимо:

типирование тканей по МНС, ABO, Rh; исключить «специфическую презентацию» – предыдущее попадание антигена трансплантата в организм хозяина; проводить иммуносупрессивную терапию до приживания трансплантата.

  1. Клинически иммунология, определение, целм, задачи. Понятие об экологической иммунологии, основные иммунотронные экологические факторы.

Клиническая иммунология — раздел иммунологии, изучающий функционирование иммунной системы у здоровых и больных неинфекционными заболеваниями людей. Объектами иссле­дования в клинической иммунологии являются люди разных возрастов, лица с врожденными или приобретенными иммунодефицитами, больные аллергическими, аутоиммунными и лимфопролиферативными заболеваниями. Важными объектами клинической иммунологии являются больные, страдающие заболеваниями сердечно-сосудистой и бронхо-легочной систем, кожными болезнями, почечной и урогенитальной патологией, лица с новообразованиями и пренесшие транс­плантацию органов.

Экологическая иммунология направление иммунологии, изучающе влияние иммунотропных экологически факторов среды (ИЭФ) на иммунную систему индивидуума в процессе онтогенеза. Иммунная система человека является цен тральной мишенью для воздействия ЙЭФ. Они относятся к факторам физической (излучение, температура, инсоляция), химической (производственные и бытовые химические вещества, лекарства), биологической (лечебные и профилактические иммунобиологические препараты, вирусы, бактерии, грибы, простейшие, гельминты) и социальной (стресс, недостаточность питания) природы. Главными экологической иммунологии являются:

а) изучение влияния иммунотропных экологических факторов на иммунную систему;

б) разработка методов и подходов донозологической диагностики нарушений иммунной системы;

в) диагностика развивающихся на этой основе иммунопатологических состояний; г) поиск причинно-следственных связей между градиентом действующих на организм ИЭФ и развивающимися иммунопатологическими процессами;

д) разработка препаратов и методов иммунокоррекции с целью профилактики и лечения экологозависимых ммунопатологических процессов;

е) организация иммуноэкологического монитоинга на экологически неблагополучных территориях и промышленных предприятиях.

  1. Иммунвдефицитньве состояния: врождённые и приобретённые. Структура первичных иммунодефнцитов.
  2. Первичные, или врожденные ИД
  3. Вторичные, или приобретенные ИД

ИД сопровождаются отсутствием (гипореактивность или ареактивность) или недостаточностью/неэффективностью реакции на ВСЕ поступающие антигены. При развитии толерантности отсутствует ответ на определенный антиген (толероген). Реактивность в отношении иных антигенов сохраняется.

А) Иммунодефициты не имеют специфичных, или патогномоннчных симптомов. Б) Заподозрить иммунодефициты можно при наличии: 1. Частой заболеваемости (более 4 раз в год)

  1. Рецидивирующих, хронических инфекции!»порюшющих различные органы и ткани и,

как правило, вызываемых оппортунистическими или условно-патогенными микроорганизмами;

  1. Опухолевых процессов;
  2. Аллергий;
  3. Аутоиммунных процессов

В) Диагностируют путем определения иммунного статуса с использованием тестов 1-го и 2-го уровней.

Первичные иммунодефициты (ПИД) — это врожденные нарушения иммунной системы, связанные с генетическими дефектами одного или нескольких компонентов иммунной системы. Классифицируются в зависимости от поражаемого звена:

ПИД с нарушением ГИО (преимущественно антительные деффекты) Причина некоторых первичных иммунодефицитов ограничивается нарушением антителообразования. или задержкой развития В-лимфоцитов, или неэффективным ответом В-лимфоцитов па сигналы I -лимфоцитов. Клинические проявления этой группы заболеваний, представлены повторными гнойными инфекциями.

— ПИД с нарушением КИО (первичный дефицит CD4, первичный дефицит CD7, дефицит IL-2)

Комбинированные ПИД (ГИО + КИО) Эта группа заболеваний клинически и иммунологически характеризуется дефектом как Т, гак и В лимфоцитов. Диагностические критерии обычно включают’ начало заболевания в раннем возрасте в виде тяжелых, потенциально смертельных инфекций, глубокое нарушение клеточного иммунитета и дефицит антител, лимфопению, в основном за счет Г лимфоцитов. Клинические проявления обычно включают задержку и отсутствие прогресса физического и моторного развития — failure to thrive, персистируюшие, вяло текущие и необычно упорные инфекции, вызванные низковирулентными оппортунистическими микроорганизмами

— ПИД с нарушением системы комплемента (чаше всего проявляется повторными гнойными инфекциями, иейссернальными инфекциями, СКВ)

— ПИД с нарушением фагоцитоза(дефицит миелопероксидазы, дефицит вторичных гранул, синдром Швахмана, дефицит адгезии лейкоцитов)

Проявляются в раннем возрасте. Связаны с генетическими дефектами и потому часто ассоциированы с анатомическими и функциональными нарушениями других, систем организма. Лечение: трансплантация, переливание крови, компонентов крови.

Вторичные иммунодефициты (ВИД). Нарушения иммунной системы, которые развиваются в позднем постнатальном периоде или у взрослых и, как ПРАВИЛО, не являются результатом генетических дефектов, развиваются в ответ на индуцирующий фактор, удаление которого приводи к восстановлению функций (транзиторный характер). Для терапии используют иммуномодуляторы (иммуностимуляторы).

Классифицируются в зависимости от индуцирующего агента:

  1. Постинфекционные ВИД:
  2. A) В результате бактериальных инфекций: туберкулез. Б) В результате вирусных инфекций: ВИЧ, герпес, корь
  3. B) В результате грибковых инфекций, паразитарных инвазий
  4. Возникающие в результате других воздействий:

А) радиоактивные воздействия; Б) Прием кортикостероидов и цитостатиков; Г) Стрессы; Д) Травмы и обширные хирургические операции; Ж) Гормональные, хронические заболевания, опухоли (диабет, заболевания почек и печени, злокачественные процессы и т. д.).

  1. Иммунный статус организма, принципы и уровни оценки. Методы определения показателей. Иммунограмма. Влияние условий и образа жизни на функции иммунной системы.

Методы изучения иммунологического статуса человека

Для характеристики иммунологического статуса человека ВОЗ рекомендует использовать тесты I и П уровней.

Тесты I уровня (ориентирующие) выявляют более выраженные отклонения в иммунной системе человека, к нйм относятся:

определение количества и % соотношение в периферической крови лимфоцитов, гранулоцитов и моноцитов;

определение Т- и В-лимфоцитов методами розеткообразования;

определение количества имглуноглобулинов классов М , G , А;

— определение фагоцитов.

Эти тесты простые, доступные для любых больничных и поликлинических лабораторий.

Тесты П уровня (аналитические) устанавливают отклонения в функционировании иммунной системы, отличаются сложностью, трудоемкостью и могу быть исполнены только в специализированных лабораториях, К ним относится определение функциональной активности Т- и В-лимфоци-тов и их субпопуляций, системы комплемента, системы мононуклеарных ; фагоцитов на различных этапах

фагоцитоза.

  1. Аутоиммунные болезни, классификация. Аутоантигены. Механизмы аутоиммунитета.

Аутоиммунное заболевание — это заболевание, обусловленное аутоантителами (антителами к собственным антигенам) и цитотоксическими Т-лимфоцитами , направленными против собственных антигенов.

Множество различных аутоиммунных заболеваний можно представить в виде единого спектра. На одном его краю находятся органоспецифические болезни, связанные с образованием органоспецифических аутоантител. В этом случае мишенью аутоиммунопатологии становится какой-то определенный орган (например, болезнь Хасимото со специфическим поражением щитовидной железы). На другом краю спектра располагаются органонеспецифические заболевания, например системная красная волчанка (СКВ ), при которой и поражения и аутоантитела не обладают органной

специфичностью. Ближе к центру этого спектра находятся болезни, при которых имеется тенденция к локальному поражению одного определенного органа, хотя образующиеся при этом аутоантитела не являются органоспецифическими, например, первичный билиарный цирроз печени. Органоспецифические заболевания имеют тенденцию встречаться в сочетаниях – сочетанная аутоиммунная патология.

Аутоантитела при заболеваниях человека

  1. Иммунопрофилактика и иммунотерапия инфекционных болезней Достижения и проблемы.

Иммунопрофилактика — метод индивидуальной или массовой защиты населения от инфекционных

заболеваний путем создания или усиления искусственного иммунитета.

Иммунопрофилактика бывает:

1 специфическая — против конкретного возбудителя

а) активная — создание иммунитета путем введения вакцин

б)пассивная — создание иммунитета путем введения сывороточных препаратов и гамма-глобулина;

  1. неспецифическая — активизация иммунной системы в общем.

Иммунотерапия — терапевтическо воздействие на имунную систему; лечение заболеваний или

нормализация физиологических состояний путем применения иммунобиологических и

химиотерапевтических препаратов и методов.

  1. Вакцины, требования к вакцинам. Виды вакцин, характеристика, методы приготовления. Новые подходы к созданию вакцин.

требования к вакцинам.

  • Безопасность- наиболее важное свойство вакцины, тщательно исследуется и контролируется в

процессе производства и применения вакцин. Вакцина является безопасной, если при введении людям

не вызывает развитие серьезных осложнений и заболеваний;

  • Протективность — способность индуцировать специфическую защиту организма против

определенного инфекционного заболевания;

  • Длительность сохранения протективности;
  • Стимуляция образования нейтрализующих антител;
  • Стимуляция эффекторных Т-лимфоцитов;
  • Длительность сохранения иммунологической памяти;
  • Низкая стоимость;
  • Биологическая стабильность при транспортировке и хранении;
  • Низкая реактогенность;
  • Простота введения.

Виды вакцин:

Живые вакцины изготовляют на основе ослабленных штаммов микроорганизма с генетически закрепленной авирулентностью. Вакцинный штамм, после введения, размножается в организме привитого и вызывает вакцинальный инфекционный процесс. У большинства привитых вакцинальная инфекция протекает без выраженных клинических симптомов и приводит к формированию, как правило, стойкого иммунитета. Примером живых вакцин могут служить вакцины для профилактики полиомиелита (живая вакцина Сэбина), туберкулеза (БЦЖ), эпидемического паротита, чумы, сибирской язвы, туляремии. Живые вакцины выпускаются в лиофилизированном (порошкообразном)

виде (кроме полиомиелитной). Убитые вакцины представляют собой бактерии или вирусы, инактивированные химическим (формалин, спирт, фенол) или физическим (тепло, ультрафиолетовое облучение) воздействием. Примерами инактивированных вакцин являются: коклюшная (как компонент АКДС), лептоспирозная, гриппозные цельновирионные, вакцина против клещевого энцефалита, против инактивированная полиовакцина (вакцина Солка).

Химические вакцины получают путем механического или химического разрушения микроорганизмов и выделения протективных, т. е. вызывающих формирование защитных иммунных реакций, антигенов. Например вакцина против брюшного тифа, вакцина против менингококковой инфекции.

Анатоксины. Эти препараты представляют собой бактериальные токсины, обезвреженные

воздействием формалина при повышенной температуре (400) в течение 30 дней с последующей очисткой и концентрацией. Анатоксины сорбируют на различных минеральных адсорбентах, например на гидроокиси алюминия (адъюванты). Адсорбция значительно повышает иммуногенную активность анатоксинов. Это связано как с созданием «депо» препарата в месте введения, так и с адъювантным

действием сорбента, вызывающего местное воспаление, усиление плазмоцитарной реакции в регионарных лимфатических узлах Анатоксины применяют для профилактики столбняка, дифтерии, стафилокакковых инфекций.

Синтетические вакцины представляют собой искусственно созданные антигенные детерминанты микроорганизмов.

В состав ассоциированных вакцин входят препараты из предыдущих групп и против нескольких инфекций. Пример: АКДС — состоит из дифтерийного и столбнячного анатоксина, адсорбированных на гидроокиси алюминия и убитой коклюшной вакцины.

Вакцины, полученные методами генной инженерии. Суть метода: гены вирулентного микроорганизма, отвечающий за синтез протективных антигенов, встраивают в геном какого — либо безвредного микроорганизма, который при культивировании продуцирует и накапливает соответствующий антиген. Примером может служить рекомбинантная вакцина против вирусного гепатита В, вакцина против ротавирусной инфекции.

В перспективе предполагается использовать векторы, в которые встроены не только гены,

контролирующие синтез антигенов возбудителя, но и гены, кодирующие различные медиаторы (белки) иммунного ответа (интерфероны, интерлейкины и т.д

В настоящее время интенсивно разрабатываются вакцины из плазмидных (внеядерных) ДНК, кодирующих антигены возбудителей инфекционных заболеваний. Идея таких вакцин состоит в том, чтобы встроить гены микроорганизма, отвественные за синтез микробного белка, в геном человека. При этом клетки человека ничинают продукцию этого чужеродного для них белка, а иммунная система станет вырабатывать антитела к нему. Эти антитела и будут нейтрализовать возбудителя в случае попадания его в организм.

  1. Поетвакцинальный иммунитет. Факторы, влияющие на его развитие Методы определения

напряжённости поствакцинального иммунитета. Значение коллективного иммунитета, методы его оценки.

Поствакцинальный иммунитет — иммунитет, который развивается после введения вакцины. На развитие поствакцинального иммунШ«ПЯрЮОТ<эдду»ОЩ)Кф|КТОры: Зависящие от самой вакцины

— качество препарата,

-доза,

— наличие протективных антигенов,

— кратность введения

зависящие от организма

состояние индивидуальной иммунной реагппност; возраст,

наличие иммунодефицита, состояние организма в целом зависянше-от внешней среды питание,

условия труда и быта, флора и фауна,

физико- химические факторы среды

 

Методы контроля эффективности поствакцинального иммунитета

Для оценки состояния искусственного поствакцинального иммунитета испольЗДОТСЯ следующие методы

-постановка серологических реакций с сыворотками вакцинированных, кожные иммунологические пробы, кожно-аллергические пробы

Оценка состояния иммунитета у населения производится в основном к инфекциям, управляемым, средствами специфической профилактики — коклюш, корь, паратит, дифтерия и столбняк Против этих инфекций имеются эффективные вакцины Кроме того выборочно осуществляют контроль эффек­тивности иммунопрофилактики и состояния коллективного иммунитета к гриппу, полиомиелиту, туберкулезу, туляремии, бруцеллезу и другим инфекциям

Для контроля состояния иммунитета используются доступные для массового обследования, высокоспецифичные и, вместе с тем, безвредные методы Чаще всего применяют серологический метод — постановку РПГА с сывороткой привитых Взятие сывороток производится выборочно у городских и сельских жителей разных возрастных групп (по 50 человек) Кровь берут из пальца по 1,5 мл — 0,75 мл сыворотки Каждая проба сы-° воротки исследуется на наличие антител к различным возбудителям Показателями оценки иммунологической защищенности являются титры антител к дифтерии и столбняку 1 20 к кори -1 4

Для выявления иммунитета к коклюшу ставится РА, защитный титр антител 1 100 Данные о серонегативных лицах, не имеющих защитного титра антител, передаются в поликлинику для разработки индивидуальных схем иммунизации

Постоянно контролируется и состояние иммунитета к вирусам гриппа РТГА (реакция торможения гемогглютинации) Защитный титр антител 1 20 в PITA Проводится также выборочный контроль иммунитета к полиомиелиту-у детей, с помощью реакции нейтрализации (рН) вируса имеющими ея в сыворотке антителами на культуре клеток При титре антител 1 16 — иммунитет напряженный Для контроля иммунитета-к дифтерии в детских коллективах (по эпидемиологическим показателям или сомнительном качестве прививок), используют также иммунологическую пробу Шика — внутрикожиое введение минимальной дозы разведенного дифтерийного токсина При наличии в крови достаточного титра антител (антитоксина) введенный токсин нейтрализуется и кожная реакция отсутствует Осуществляется также контроль эффективности вакцинопрофилактики туляремии путем постановки кожно-аллергической пробы о тулярином, при отрицательной пробе-иммунитет отсутствует Постановка кожно-аллергической пробы с туберкулином позволяет выявить наличие нестерильного иммунитета к туберкулезу С 1984 года используется также новый аллерген-тетанин для постановки кожно-аллергической пробы с целью контроля состояния иммунитета к столбняку Проведение иммунологического контроля эффективности вакцинопрофилактики позволяет оценить фактическую защищенность к данной инфекции и качество прививочной работы и в необходимых случаях

  1. Пассивная иммунопрофилактика. Показания к проведению. Лечебно-профилактические иммунные сыворотки и сывороточные препараты, способы получения, области применения.

Пассивная иммунопрофилактика — создание иммунитета путем введения сывороточных препаратов и

гамма-глобулина;

Сывороточные препараты — содержат готовые антитела. В зависимости от назначения они делятся на

лечебно-профилактические и диагностические, от степени очистки — на сывороточные,

полиглобулиновые и гамма-глобулиновые препараты, по происхождению — от животных и

человеческие; последние подразделяются на донорские и плацентарные.

Для изготовления сывороточных препаратов в настоящее время используют три метода:

  1. Иммунизация животных с целью получения поливалентных сывороток, т.е. содержащих антитела как к специфическим, так и к групповым антигенам иммунизирующего микроба. Такие сыворотки часто дают т.н. групповые серологические реакции. Поэтому для уоиления их спе­цифичности проводят адсорбцию из них антител к групповым антигенам:
  2. Получение моноклональных антител, продуцируемых после имунизации животного отдельными плазматическими клетками, «слитыми» с клетками определенных опухолевых линий. Такая гибридома имеет объединенный геном: от плазматической клетки она наследует способность к продукции определенных антител, от опухолевой — способность к длительному размножению. Назначение гибридом — длительная продукция антител одной специфичности.
  3. Получение сыворотки людей, ранее переболевших или вакцинированных и потому имеющих определенные титры антител, как правило, к возбудителям различных инфекционных болезней Сыворотки получают либо от доноров, либо из смеси плацентарной крови. В них, как правило, содержатся антитела к вирусу кори, и в разных количествах антитела к стафилококкам,стрептококкам, эшерихиям, протею, псевдомонас, возбудителям гриппа, коклюша, полиомиелита, инфекционного гепатита.

Лечебно-профилактические сывороточные препараты используют для создания искусственного

пассивного иммунитета при экстренной профилактике и иммунотерапии следующих заболеваний:

стафилококковых инфекций — антистафилококковая человеческая плазма или антистафилококковый

человеческий иммуноглобулин;

коклюша — нормальный человеческий иммуноглобулин ;

гриппа — донорский гаммаглобулин;

кори — нормальный человеческий иммуноглобулин;

полиомиелита — нормальный человеческий иммуноглобулин;

гепатита А — нормальный человеческий иммуноглобулин;

столбняка — антитоксическая лошадиная сыворотка или (у лиц с аллергией к лошадиному белку) —

провостолбнячный антитоксический человеческий иммуноглобулин (от вакцинированных доноров);

раневых анаэробных инфекций — противогангренозные (антиперфрингенс А, антиэдематиено,

антисептикум) лошадиные сыворотки ;

ботулизма -антиботулинистические А,В,С. лошадиные сыворотки;

дифтерии — антитоксическая лошадиная сыворотка;

бешенства — антирабический лошадиный гамма-глобулин и иммуноглобулин из сыворотки людей,

вакцинированных против бешенства

  1. Иммунокоррекция. Показания к проведению. Методы подавления и стимуляции иммунного ответа, препараты для мммунокоррекции.

Иммунокоррекция — терапевтические, хирургические или генетические способы восстановления нормальной функции иммунной системы. Иммуносупрессия — терапевтическо ингибирование функциональной активно™ В- и Т-лимфоцитов, биосинтеза и процесса продуцирования антител, цитокинов, регуляторной и эффекторной активности последних путем направленного применения иммунодепрессивных препаратов. Проводится при лечении аутоиммунных аллергических, лимфопролиферативных заболеваний, при трансплантации органов и тканей.

Иммунодепрессанты — вещества, которые в терапевтических концентрациях частично или полностью подавляют специфический иммунный ответ на действие антигена. К первым относятся алкилирующие соединения (циклофосфан, хлорбу-тин), кортикостероиды (преднизолон, дексаметазон), антибиотики (актиномицин D и С, циклоспорин А), антиметаболиты (меркаптопурин, азатиоприн), алкалоиды (винкристин, винбластин), антагонисты фолиевой кислоты (метотрексат), монокло-нальные антилимфоцитарные антитела и др. Циклоспорин А и такролимус (FK-506) оказывают супрессивный

эффект на уровне активации Т-лимфоцитов, синтеза цитокинов посредством ингибиции лимфоцитарной кальциневриновой (КН) фосфатазы. Микофенолат мофетил (ММФ) ингибирует инозин монофосфат дегидрогеназу, сиролимус (srl) и лифлуномид (LFM) — активацию Т-лимфоцитов Используются для лечения аллергических, аутоиммунных, инфекционных заболеваний, подавления трансплантационной реакции.

Иммуностимуляторы — лекарственные вещества, повышающие функциональную активность, содержание клеток и молекул иммунной системы и восстанавливающие иммунологическую компетент­ность организма. Могут быть естественного и синтетического присхождения. Иммуностимуляторами естественного происхождения являются пирогенал (ЛПС, полученный из псевдоманас); продигиозан (полисахарид, полученный из грибков); зимозан (полисахарид, полученный из дрожжей); натрия нуклеинат (натриевая соль РНК дрожжей); вакцина БЦЖ (микобактерии бычьего вида); мурамиддипептид (препарат из нокардий); рибомунил (рибосомальные белки стрептококков, клебси-елл, гемофильных бактерий); ликопид, пицибанил (препарат из стрептококков); лентинан (получен из грибов); биостим (препарат из клебсиелл); крестин (препарат из мицелия бластомицетов); бестатин (ингибитор аминолептидазы); паспат (лизат стрептококов, стафилококков, гемофильной палочки), пептидогликаны и др. К иммуностимуляторам растительного происхождения относятся адаптогены (препараты элеутерококка, лимонника, женьшеня, иммунал и др.) Иммуностимуляторы животного происхождения представляют собой препараты, полученные из селезенки (спленин), плаценты, тимуса (тактивин, тимактид, тималин, тимозин, тимоптин, тимостимулин, тимический сывороточный фактор, тимоген), костного мозга (миелопид). К иммуностимуляторам синтетического происхождения относятся дибазол, диуцифон, левамизол, ликопид, пентоксил, полудан, метилурацил, изопринозин, ке-мантан, тимулин, тимопептиды (4,5), им-мунофан, и др.

Иммуномодуляция — способ лекарственного воздействия на иммунокомпетентные клетки или имунную систему в целом для востановления сбалансированного нормального функционирования ее.

Добавить комментарий

Ваш e-mail не будет опубликован. Обязательные поля помечены *